廣東省客家人群hGSTs基因多態(tài)性研究.pdf

1、了解代謝酶基因多態(tài)性在人群中的分布規(guī)律,可以為疾病與基因多態(tài)性相關(guān)研究提供具體的遺傳本底資料.近年來國際上不少研究室開展了人群中GSTs基因多態(tài)性分布規(guī)律研究,結(jié)果表明不同種族、不同民族、不同地區(qū)人群中GSTs基因多態(tài)性分布存在差異.國內(nèi)也有學(xué)者報(bào)道了中國北方及中部地區(qū)人群GSTs基因多態(tài)性分布,而對南方客家地區(qū)人群研究未見報(bào)道.該課題是廣東省自然科學(xué)基金團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目"環(huán)境污染物代謝酶基因多態(tài)性與人群肺癌和心血管疾病相關(guān)關(guān)系研究"的分課題之

2、一,為做好該團(tuán)隊(duì)課題的基礎(chǔ)資料收集工作,因此,該研究通過對中國廣東省客家地區(qū)人群GSTs基因多態(tài)性分布規(guī)律進(jìn)行研究,為進(jìn)一步了解GSTs基因多態(tài)性與環(huán)境因素引起相關(guān)疾病的關(guān)系研究提供基礎(chǔ)資料.研究目的:探索廣東省客家地區(qū)人群谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶基因多態(tài)性分布規(guī)律,并對環(huán)境相關(guān)疾病的危險(xiǎn)因素進(jìn)行初步分析,為進(jìn)一步開展環(huán)境污染物代謝酶基因多態(tài)性與環(huán)境相關(guān)疾病的研究提供基礎(chǔ)資料.材料和方法:1.研究人群 選擇廣東省客家人居住比較多的梅州地區(qū)健康客

3、家人群作為研究人群,用統(tǒng)一的調(diào)查表收集所有研究對象的相關(guān)資料.2.DNA抽提 用經(jīng)典的酚—氯仿法抽提外周血DNA. 3.GSTs基因聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片斷長度多態(tài)性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析利用引物設(shè)計(jì)軟件Primer Premier 5.0,參考有關(guān)文獻(xiàn)分別設(shè)計(jì)GSTA1、GSTM1、GSTM3、GST

4、T1、GSTP1基因相應(yīng)位點(diǎn)的引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增.以β-Globin為內(nèi)對照,雙重PCR分別聯(lián)合擴(kuò)增GSTT1和GSTM1基因,鑒定基因型.常規(guī)PCR擴(kuò)增GSTA1和GSTP1基因,再分別進(jìn)行限制性酶切反應(yīng),判斷基因型.常規(guī)PCR擴(kuò)增GSTM3基因后,進(jìn)行12％非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE),鑒定基因型.4.數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析 用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件對所得