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文檔簡(jiǎn)介
1、酪蛋白磷酸肽是以乳酪蛋白為原料,經(jīng)單一酶或復(fù)合酶水解,再經(jīng)分離純化而得到的含有磷酸絲氨?;亩嚯?。本實(shí)驗(yàn)以水牛乳酪蛋白為原料,制備水牛乳酪蛋白磷酸肽,可以深化水牛乳的深加工,豐富水牛乳乳制品,增加水牛乳的附加值。因此開(kāi)展水牛乳酪蛋白磷酸肽的研究具有重要的價(jià)值。 經(jīng)過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)比較了Alcalase堿性蛋白酶和Neutrase中性蛋白酶對(duì)水牛乳酪蛋白水解度的影響。研究結(jié)果表明,Alcalase堿性蛋白酶的酶解效果較好。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)
2、,優(yōu)化出了Alcalase堿性蛋白酶酶解水牛乳酪蛋白的條件:溫度為70℃,酸度為pH 7.0,酶:底物=3.0:100,底物濃度為5.0%。在該條件下水牛乳酪蛋白溶液的水解度可以達(dá)到20.05%。 通過(guò)酶解實(shí)驗(yàn)研究,確定了用Alcalase堿性蛋白酶制備水牛乳酪蛋白磷酸肽的工藝參數(shù),用該法可制備出水牛乳酪蛋白磷酸肽粗品,粗品經(jīng)分析檢測(cè)表明:N/P摩爾比為20,水分含量6.5%,灰分含量8.0%。 采用離子交換層析技術(shù),開(kāi)
3、展了水牛乳酪蛋白磷酸肽粗品純化工藝研究,得到了純化產(chǎn)品:經(jīng)大孔強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂純化得到的酪蛋白磷酸肽(CPP Ⅰ)的N/P摩爾比為4,經(jīng)弱堿性陰離子交換樹(shù)脂得到的酪蛋白磷酸肽(CPP Ⅱ)N/P摩爾比為6。該研究結(jié)果表明,通過(guò)離子交換技術(shù)可以精制水牛乳酪蛋白磷酸肽,而且大孔強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂的純化效果更好。通過(guò)HPLC分析測(cè)定發(fā)現(xiàn),粗品CPP、精制品CPP Ⅰ和CPP Ⅱ分別主要集中于1,260 Da、970 Da和1,090 D
4、a分子量左右。 水牛乳酪蛋白磷酸肽的功能研究實(shí)驗(yàn)表明,酪蛋白磷酸肽可以有效地阻止磷酸鈣、磷酸亞鐵沉淀的形成,并且酪蛋白磷酸肽的N/P摩爾比越低,含量越高,阻止效果越好。在pH為8.0時(shí)有利于酪蛋白磷酸肽阻止磷酸鈣沉淀的形成;在100℃以下,溫度的變化對(duì)酪蛋白磷酸肽的功能沒(méi)有很大影響;檸檬酸與酪蛋白磷酸肽有一定的協(xié)同作用,在酪蛋白磷酸肽含量一定的情況下,增加檸檬酸的含量會(huì)阻止磷酸鈣沉淀形成的時(shí)間;木糖醇與酪蛋白磷酸肽也具有一定的協(xié)
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