慢性銅暴露惡化AD轉(zhuǎn)基因小鼠空間記憶的關(guān)鍵分子篩選.pdf

1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文題名（中英對照）：慢性銅暴露惡化AD轉(zhuǎn)基因小鼠空間記憶的關(guān)鍵分子篩選IdentificationofthekeymoleculesinvolvedinchroniccopperexposureaggravatedmemyimpairmentintransgenicmiceofAlzheimer’sdisease作者姓名：余君指導(dǎo)教師姓名：許華及學(xué)位、職稱：博士研究員學(xué)科、專業(yè)名稱：理學(xué)微生物與生化

2、藥學(xué)學(xué)位類型：學(xué)術(shù)學(xué)位學(xué)位類型：學(xué)術(shù)學(xué)位論文提交日期：2015年4月20日論文答辯日期：2015年5月26日答辯委員會主席：黃亞東研究員論文評閱人：劉培慶教授謝秋玲研究員學(xué)位授予單位和日期：暨南大學(xué)2015年6月30日I摘要摘要目的目的：阿爾茲海默病（Alzheimer’sdisease，AD）是一種常見的神經(jīng)退行性疾病，其主要臨床表現(xiàn)為認(rèn)知功能的漸進(jìn)性損傷。過量的銅暴露能夠加速AD的發(fā)生與發(fā)展，但是目前對于銅是通過何種機(jī)制影響AD（如

3、空間記憶）尚不清楚。本文旨在初步探討慢性銅暴露對AD空間記憶的影響并篩選出參與該過程的關(guān)鍵蛋白。方法：方法：本文選用6月齡的三轉(zhuǎn)基因AD（3xTgAD）小鼠作為AD模型，用含250ppm硫酸銅的飲用水喂養(yǎng)其6個(gè)月，同時(shí)以未暴露銅的3xTgAD小鼠和野生型（widetype，WT）小鼠作為對照。首先，采用水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測慢性銅暴露對3xTgAD小鼠的記憶能力的影響。隨后，我們利用熒光差異雙向凝膠電泳（twodimensionalfluesc

4、encedifferencegelelectrophesis，2DDIGE）結(jié)合質(zhì)譜分析的方法研究慢性銅暴露對3xTgAD小鼠海馬蛋白質(zhì)組的影響。最后，使用Westernblot對差異蛋白進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。結(jié)果：結(jié)果：水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，慢性銅暴露可加速3xTgAD小鼠的記憶損傷。2DDIGE結(jié)合質(zhì)譜分析的結(jié)果表明，在3xTgAD小鼠與WT小鼠海馬組織中共有39個(gè)差異表達(dá)的蛋白。慢性銅暴露后的3xTgAD小鼠與未暴露的3xTgAD小鼠相

5、比，其海馬組織中共有37個(gè)差異表達(dá)的蛋白。其中，記憶相關(guān)蛋白complexin1和complexin2在未暴露的3xTgAD小鼠海馬組織中表達(dá)量下調(diào)（與WT小鼠相比），而在慢性銅暴露后的3xTgAD小鼠海馬組織中其表達(dá)量進(jìn)一步下調(diào)。Westernblot進(jìn)一步驗(yàn)證了complexin1與complexin2的表達(dá)，其結(jié)果與2DDIGE的結(jié)果的一致。結(jié)論：結(jié)論：綜上結(jié)果表明，慢性銅暴露加速了3xTgAD小鼠的記憶損傷，并改變了其海馬組織中