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1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)錄因子IRF4在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及與其預(yù)后關(guān)系的研究姓名:王姣杰申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:宋永平20070501鄭州大學(xué)2007屆碩士畢業(yè)論文轉(zhuǎn)錄因子IRF4在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及與其預(yù)后關(guān)系的研究種骨髓瘤相關(guān)癌基因,是干擾素調(diào)節(jié)因子家族中的成員,較其它成員特異表達(dá)于淋巴細(xì)胞。IRF4屬于轉(zhuǎn)錄因子的一種,在基因調(diào)控中起重要作用,其異常表達(dá)是由于t(6:14)(P25:q32)染色
2、體異位,即IRF4異位到第14號染色體IgH增強予位點,導(dǎo)致MUMl蛋白過表達(dá),從而促進腫瘤形成。IRF4/MUMl能促進成纖維母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化以及其缺失的淋巴細(xì)胞凋亡增加均提示其癌基因的范疇。既往資料表明IRF4在大多數(shù)多發(fā)性骨髓瘤患者中異常表達(dá)。近來研究報道IRF4/MUMl在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中有50%75%的陽性率,但其與預(yù)后的關(guān)系目前仍不能確定。為明確IRF4/MUIll與DLBcL臨床預(yù)后的關(guān)系。深入探討DLBCL的發(fā)病機制,
3、以及尋找治療DLBCL新方法和新途徑,我們進行了這方面的研究。研究分兩部分進行,第一部分為臨床研究,以臨床確診的DLBCL病人為研究對象,免疫組化方法檢測IRF4的表達(dá)情況并觀察IRF4陽性及陰性患者的生存期,探討IRF4的表達(dá)與DLBcL的預(yù)后關(guān)系第二部分為體外研究,以B淋巴瘤細(xì)胞株Namalwa和Daudi為研究對象,利用不同濃度的阿霉素聯(lián)合萬珂(Velcade)作用于細(xì)胞株,探討轉(zhuǎn)錄因子IRF4在其中的表達(dá)及與化療藥物耐藥的關(guān)系,
4、同時觀察蛋白酶體抑制劑Velcade對IRF4的影響,為臨床治療提供理論依據(jù)。研究對象與方法1、收集河南省腫瘤醫(yī)院和上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院20012005年經(jīng)病理確診的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者及其病理臘塊標(biāo)本,患者共有95例,男性58例,女性37例;年齡18—84歲,中位年齡5l歲。免疫組織化學(xué)方法探討IRF4的表達(dá)情況,將患者分為IRF4()組和IRF4(一)組,隨訪兩組患者,探討2年無病生存率和總生存率有無差別。2、B細(xì)胞淋
5、巴瘤Namalwa和Daudi細(xì)胞株培養(yǎng)于含10%胎牛血清的RPMI一1640培養(yǎng)液中,置于37“C、5%C02、飽和濕度的培養(yǎng)箱,兩天傳代一次。3、四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色實驗應(yīng)用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,每孔接種210‘個細(xì)胞于200Il1RPMll640培養(yǎng)體系中,分別加入不同濃度的阿霉素(0、5、10、20、30、50、lOOng/m1);對于Namalwa細(xì)胞株,Velcade15nM聯(lián)合加入不同濃度的阿霉素組。每種用藥濃度設(shè)三復(fù)
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