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文檔簡介
1、冷凍治療技術(shù)是一種比較安全的治療手段,可減少術(shù)中出血,減輕疼痛,可增強機體免疫力,抑制及破壞腫瘤細胞生長,促使轉(zhuǎn)移病灶的吸收。由于冷凍外科具有上述的優(yōu)點,在醫(yī)學界得到廣泛的重視,臨床上已得到廣泛的應(yīng)用。冷凍手術(shù)現(xiàn)在已廣泛用于皮膚、腫瘤、婦科、泌尿科以及肝臟等各種疾病的治療。用冷凍治療前列腺癌腫瘤時,因為前列腺底部與直腸臨近,冷量過大會傷及直腸,引起并發(fā)癥,所以無法達到安全的冷凍邊界,使得冷凍邊界部分細胞存活,引發(fā)疾病的復(fù)發(fā)。因此,單純冷
2、凍療效還是有限的,以冷凍為基礎(chǔ)的各種療法的聯(lián)合應(yīng)用是冷凍治療發(fā)展的必然趨勢。冷凍與化療藥物聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同殺死腫瘤的作用,但兩者聯(lián)合過程中,加藥的時間以及藥物的劑量控制都有待進一步的研究。本文對冷凍-5-FU聯(lián)合應(yīng)用過程中不同加藥時間對前列腺癌(PC-3)細胞活率的影響以及冷凍后在不同時間點細胞凋亡情況進行了研究。 首先,進行了置核實驗的研究,并對人的PC-3細胞在慢速冷凍過程中的變化進行了觀察。通過兩種不同置核方式的比較得出,
3、冷臺需要在-4℃置核,才能出現(xiàn)冰晶,而用預(yù)冷針頭只需在-1.5℃置核,就能出現(xiàn)冰晶。但用冷臺置核時,不用將冷臺蓋旋下,可以避免空氣對溶液的影響。所以本實驗中,都是利用冷臺系統(tǒng)本身的特點進行置核。細胞懸液置核后,降溫速率為5℃/min時,細胞外冰晶呈枝狀生長,PC-3細胞體積變小,復(fù)溫后細胞體積稍微增大。 其次,研究了慢速冷凍過程中降溫速率、復(fù)溫速率及冷凍終溫對PC-3細胞活率的影響,并對冷凍后細胞的死亡方式進行了分析。實驗結(jié)果表
4、明,在相同終溫條件下,降溫速率越快、復(fù)溫速率越慢,細胞的活率愈低。不同終溫時,溫度越低,細胞的活率越低。冷凍后PC-3細胞用Hoechst33342和PI雙染的方法分析表明,細胞死亡的方式有三種:細胞凋亡、細胞壞死和細胞破裂,但主要方式為細胞壞死和細胞破裂。 最后,研究了冷凍-5-FU聯(lián)合應(yīng)用過程中不同加藥時間對前列腺癌(PC-3)細胞活率的影響以及不同加藥時間對細胞死亡方式的影響。實驗考察了冷凍前加藥、冷凍同時加藥以及冷凍后加
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