不同survivin siRNA對PC-3細胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的： 觀察靶向survivin基因的不同siRNA在不同時間點對人雄激素非依賴性前列腺癌PC-3細胞survivin mRNA表達的抑制作用以及對細胞增殖和凋亡的影響。 方法： 本研究以雄激素非依賴性前列腺癌PC-3細胞株為研究對象，采用針對survivin基因二個不同位點，分別設(shè)計單獨及同時負載二個survivin shRNA片段質(zhì)粒載體。以脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染PC-3細胞株后，在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率。實驗分為s

2、urvivin1組、survivin2組、survivin1+2組、陰性對照組和空白對照組。轉(zhuǎn)染后24 h、48 h和72 h，用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測細胞中survivin mRNA的表達，MTT法檢測siRNA對PC-3細胞增殖的影響，流式細胞術(shù)檢測凋亡率。 結(jié)果： 與對照組相比，survivin1組、survivin2組、survivin1+2組轉(zhuǎn)染后24 h即對survivin mRNA的表

3、達均能產(chǎn)生抑制效應(yīng)，48 h抑制率最高，72 h后下降。三個實驗組以survivin1抑制率最高，轉(zhuǎn)染48 h后達到52％。實驗組均能抑制PC-3細胞的增殖，其中以Survivin1抑制細胞的增殖能力最強。在誘導PC-3細胞的凋亡的研究中，質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞轉(zhuǎn)染48 h后，細胞凋亡最明顯，其中survivin1組凋亡率較高，達(13.6％±1.8％)。 結(jié)論： 負載survivin shRNA的質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染PC-3細胞后，能明