腎茶的揮發(fā)性成分GC-MS分析及其對(duì)腎小球腎炎大鼠干預(yù)作用的代謝組學(xué)研究.pdf

1、腎茶（Clerodendranthus spicatus（Thunb.）C.Y.Wu），又名貓須草、貓須公、“牙努秒”，唇形科腎茶屬多年生草本植物[1]。該屬植物全世界僅有5種，我國(guó)以云南思茅和西雙版納地區(qū)種植最多。腎茶全草入藥，味苦，性涼。腎茶的臨床應(yīng)用已有兩千多年歷史，且療效確切、可靠。傣族醫(yī)書“檔哈雅”、“貝葉經(jīng)”中記載腎茶可用于治療小便熱、澀、疼痛等泌尿系統(tǒng)疾病。近年來(lái)由于腎臟疾病的發(fā)病率不斷上升且患者呈現(xiàn)年輕化的趨勢(shì)，因而受到

2、社會(huì)的廣泛關(guān)注。目前對(duì)腎茶的相關(guān)研究?jī)H限于臨床觀察，基礎(chǔ)研究薄弱，為有效闡明中藥物質(zhì)基礎(chǔ)及體內(nèi)代謝過(guò)程，本實(shí)驗(yàn)對(duì)其揮發(fā)性成分及治療腎小球腎炎的代謝組學(xué)進(jìn)行了初步研究。
　　采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)腎茶中的揮發(fā)性成分進(jìn)行了研究，利用自動(dòng)質(zhì)譜去卷積鑒定系統(tǒng)（AMDIS）和美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所質(zhì)譜庫(kù)（NIST05a），并結(jié)合正構(gòu)烷烴在程序升溫條件下的色譜保留指數(shù)（PTR），對(duì)腎茶中的揮發(fā)性成分進(jìn)行了精準(zhǔn)定性分析。共確認(rèn)出匹配度80

3、％以上的化學(xué)成分30種，成功鑒定了包埋峰和同分異構(gòu)體現(xiàn)象，提高了準(zhǔn)確度和可靠性。在此基礎(chǔ)上建立了腎茶揮發(fā)性成分 GC-MS指紋圖譜，以相關(guān)系數(shù)法對(duì)不同批次腎茶樣品的相似度進(jìn)行了評(píng)價(jià)。與常規(guī)化學(xué)成分的定性分析相比，多種分析技術(shù)聯(lián)用的方法采集到的信息量更多、更全面，結(jié)果準(zhǔn)確性大大增加，有效地辨別和分析出了化合物成分中的同分異構(gòu)體，為體外成分研究提供可靠依據(jù)。所建立的腎茶揮發(fā)性成分 GC-MS指紋圖譜，通過(guò)提取分離條件的不斷優(yōu)化使色譜峰峰型達(dá)

4、到最佳，大多數(shù)色譜峰分離度達(dá)到要求，相似度評(píng)價(jià)表明其具有良好的精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性，符合指紋圖譜的要求。
　　采用代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)腎茶治療大鼠腎小球腎炎模型的作用機(jī)制進(jìn)行研究。以注射陽(yáng)離子化牛血清白蛋白（C-BSA）的方法成功建立大鼠腎小球腎炎模型，灌胃給予腎茶水提取液和醇提取液進(jìn)行有效干預(yù)，取血清以柱前衍生-氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)血清中代謝產(chǎn)物的變化，運(yùn)用質(zhì)譜解析、偏最小二乘判別分析（PLS-DA）等多元統(tǒng)計(jì)分析技術(shù)確定差異代謝產(chǎn)物。

5、與空白組比較，模型組血清中花生四烯酸、肌酐、膽固醇、十六烷酸、賴氨酸、乳糖、甘氨酸、琥珀酸、單棕櫚酸甘油、亞油酸、乙酸銨、甘油、乙二酸、環(huán)戊酮、丙氨酸、脯氨酸含量升高，纈氨酸含量降低。給予腎茶提取液后各項(xiàng)指標(biāo)均有所回調(diào)。實(shí)驗(yàn)表明，腎茶對(duì)于腎小球腎炎具有較好的治療作用，改善腎功能、調(diào)節(jié)脂肪酸代謝、促進(jìn)氨基酸生成可能是其防治腎小球腎炎的作用機(jī)理。
　　本文對(duì)腎茶揮發(fā)性成分及治療腎小球腎炎的代謝組學(xué)研究均屬首次，采用多元數(shù)據(jù)分析技術(shù)對(duì)其