2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  觀察不同濃度的乳鐵蛋白(Lactoferrin LF)對原代大鼠成骨細(xì)胞增殖的影響,探討低濃度乳鐵蛋白(<100ug/ml)及高濃度乳鐵蛋白(>100 ug/ml)與成骨細(xì)胞增值的關(guān)系,為乳鐵蛋白的進(jìn)一步研究提供參考依據(jù)。
  方法:
 ?。?)采用混合酶法從SD乳鼠頭蓋骨中分離原代大鼠成骨細(xì)胞,通過采用多次“差速貼壁法”對成骨細(xì)胞進(jìn)行純化。光鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生長狀況,并用堿性磷酸酶染色及Ⅰ型膠原免

2、疫組化染色鑒定。
  (2)取第二代成骨細(xì)胞,以3000個/孔的細(xì)胞數(shù)量種于96孔板,不同濃度乳鐵蛋白干預(yù)成骨細(xì)胞,乳鐵蛋白濃度分別為0.1ug/ml,1ug/ml,10ug/ml,100ug/ml,200ug/ml,400ug/ml,600ug/ml,800ug/ml,1000ug/ml,在1,3,5,7天后分別采用CCK-8法測定細(xì)胞增殖。
 ?。?)統(tǒng)計學(xué)方法:各實驗數(shù)據(jù)采用x±s表示,應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行

3、統(tǒng)計分析,各組間比較采用單因素方差分析(One-way ANOVA)。P﹤0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
  結(jié)果:
  (1)原代培養(yǎng)的細(xì)胞具有成骨細(xì)胞的典型特征,形態(tài)多樣,呈三角形、多邊形、長梭形等形態(tài),有長短不一的突起,可見胞核,并伸有粗大偽足;堿性磷酸酶染色及Ⅰ型膠原免疫組化染色呈陽性。
  (2)CCK-8法結(jié)果顯示:干預(yù)第一天,1ug/ml、10ug/ml、100ug/ml濃度乳鐵蛋白組細(xì)胞增殖均明顯高于對照

4、組(p<0.01),200 ug/ml、400 ug/ml、600 ug/ml組均低于對照組(P<0.05),800ug/ml和1000 ug/ml低于對照組(P<0.01)。干預(yù)第三天,0.1ug/ml、1 ug/ml組吸光度值高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),而10ug/ml、100 ug/ml組較對照組升高,有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),200 ug/ml組吸光度值低于對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),4

5、00 ug/ml組吸光度值低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),600ug/ml、800 ug/ml和1000 ug/ml組吸光度值低于對照組,差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。干預(yù)第五天,0.1ug/ml、1ug/ml、10 ug/ml組均高于對照組(p<0.05),100 ug/ml組明顯高于對照組(p<0.01),200ug/ml、400ug/ml、600ug/ml、800ug/ml和1000ug/ml組明顯低于對照組

6、(p<0.01)。干預(yù)第七天,1 ug/ml組明顯高于對照組(p<0.01),而0.1 ug/ml、10ug/ml、100ug/ml組雖高于對照組,但無統(tǒng)計學(xué)意義,200ug/ml、400ug/ml、600ug/ml、800 ug/ml和1000 ug/ml組明顯低于對照組(p<0.01)。同時,各干預(yù)組干預(yù)1,3,5,7天,各孔的吸光度值隨著干預(yù)時間的延長而上升。
  結(jié)論:
 ?。?)采用胰酶和Ⅰ型膠原酶混合酶消化法體外

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