乳鐵蛋白通過(guò)上調(diào)IGF-1抑制原代大鼠成骨細(xì)胞的凋亡.pdf

1、目的：研究乳鐵蛋白抑制原代大鼠成骨細(xì)胞凋亡作用機(jī)制。
　　方法：用混合酶消化法培養(yǎng)得到的成骨細(xì)胞，分為對(duì)照組（0μg/mL）、LF1組（0.1μg/mL）、LF2組（1μg/mL）、LF3組（10μg/mL）、LF4組（100μg/mL）、LF5組（1000μg/mL）的乳鐵蛋白干預(yù)24 h，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)成骨細(xì)胞的凋亡；RT-PCR方法測(cè)定成骨細(xì)胞IGF-1基因表達(dá)。構(gòu)建靶向沉默I GF-1的s iRN A慢病毒載體，將體外培養(yǎng)

2、的第二代的成骨細(xì)胞分為對(duì)照組、LF組（10μg/mL）、陰性IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組+LF（10μg/mL）、IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組、IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組+LF（10μg/mL），干預(yù)24 h，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)成骨細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)果：（1）1μg/mL、10μg/mL、100μg/mL乳鐵蛋白均發(fā)揮抑制成骨細(xì)胞凋亡作用。10μg/mL乳鐵蛋白抑制成骨細(xì)胞凋亡作用最強(qiáng)。但1000μg/mL乳鐵蛋白是促進(jìn)成骨細(xì)胞凋亡

3、。（2）10μg/mL、100μg/mL、1000μg/mL乳鐵蛋白促進(jìn)IGF-1mRNA的表達(dá)。（3）LF組、陰性IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組+LF組與對(duì)照組相比，凋亡率明顯下降，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01）；IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組+LF組與陰性IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組+LF組比較，凋亡率升高10％，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組（10μg/mL）與IGF-1-siRNA轉(zhuǎn)染組+LF組比較