人參養(yǎng)榮湯對亞急性老化肝、腦細胞線粒體保護的機理研究.pdf

1、目的：衰老與人類壽命和死亡密切相關，它是一個復雜的生理過程，涉及許多領域。有關衰老的機理，學者們曾提出許多學說，其中自由基學說認為：引起人體衰老的主要原因是人體的細胞代謝過程中不斷產(chǎn)生的自由基，它與活細胞大部分發(fā)生反應，損傷DNA分子，造成鍵斷裂。過量自由基，促進膜內(nèi)不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應，引起膜結(jié)構和生理功能紊亂，此為衰老的重要根源之一。 線粒體幾乎存在于所有組織細胞內(nèi)，它可以實現(xiàn)呼吸功能、能量轉(zhuǎn)換及新陳代謝，是維持細

2、胞以至整個機體生理活動的能量基礎。近年來對線粒體分子生物學的深入研究發(fā)現(xiàn)：伴隨增齡其結(jié)構、功能出現(xiàn)許多退行性變化，是逐步導致全身性生理功能下降的主要因素。因此以線粒體結(jié)構成分的衰變?yōu)橹行?，形成一種線粒體衰變循環(huán)學說。 機體老化是正常生理過程，長期臨床與實驗研究證實：不論是單味方，還是中藥復方，都可以通過各種不同途徑如抗脂質(zhì)過氧化、消除自由基、改善循環(huán)功能、抗細胞凋亡等發(fā)揮抗衰老作用。故中醫(yī)中藥配伍得當，正確運用，對于防止和延緩衰

3、老是完全可能的。傳統(tǒng)中藥抗衰老組方規(guī)律主要為調(diào)補以腎為主，或補后天以養(yǎng)先天兩大類。而無論補腎還是益脾均以五臟六腑功能為基礎構成要素，補陽、養(yǎng)陰、補氣、理氣、補血、活血、收澀、利濕、養(yǎng)血安神為主要配伍內(nèi)容。此規(guī)律體現(xiàn)“治病求本，以平為期”這一中醫(yī)最主要的防病、治病、抗老、防衰的根本指導思想。人參養(yǎng)榮湯為氣血雙補，以后天養(yǎng)先天之代表方劑。臨床報道表明：它對于病后虛弱、貧血等氣血兩虛引發(fā)的癥狀有良好療效。動物實驗表明：它具有延緩自然老化鼠胃腸

4、衰老，改善快速老化模型鼠腸黏膜形態(tài)的作用。為進一步探討該方劑的抗衰老作用機制，我們選用亞急性衰老鼠為模型，通過血清酶學、組織病理學、形態(tài)計量學等方法圍繞肝、腦組織與其細胞線粒體的檢測來觀察人參養(yǎng)榮湯對衰老動物抗氧化能力及其線粒體結(jié)構功能的影響。 方法：1.建立亞急性衰老小鼠模型，設立不同濃度中藥觀察組。2.通過對血清酶學SOD、MDA的測定，探討人參養(yǎng)榮湯抗氧化作用機制。 3.通過組織病理、超微結(jié)構觀察，探討人參養(yǎng)榮湯對

5、肝、腦組織細胞形態(tài)的影響： (1)通過對線粒體超微結(jié)構形態(tài)計量學定量分析，探討人參養(yǎng)榮湯改善線粒體結(jié)構衰變的作用。 (2)通過對線粒體膜流動性及線粒體MDA的測定，探討人參養(yǎng)榮湯對線粒體膜流動性的影響。 (3)通過對線粒體DNA片段缺失的測定，探討人參養(yǎng)榮湯對線粒體DNA片段缺失的修復作用。 結(jié)果：1.成功建立亞急性衰老小鼠動物模型。模型鼠肝、腦組織生理學可見老化改變。電鏡下可見該組織線粒體腫脹、嵴缺失，

6、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張等衰老變化。血清酶學測定符合衰老鼠的血清改變。 2.模型鼠伴隨血清SOD升高、MDA下降，線粒體膜流動性下降，線粒體MDA濃度升高；線粒體超微結(jié)構形態(tài)計量學統(tǒng)計表現(xiàn)為線粒體數(shù)目減少，總體積下降，線粒體腫脹，嵴減少，內(nèi)膜面積減小。 3.人參養(yǎng)榮湯可有效改善衰變肝、腦組織與細胞生理學形態(tài)的老化損傷。 4.人參養(yǎng)榮湯可顯著提高血清SOD活性，減低MDA含量。 5.人參養(yǎng)榮湯有效降低線粒體MDA含量，提

7、高線粒體膜流動性。 6.人參養(yǎng)榮湯對線粒體損傷呈有意改善，即線粒體數(shù)目增多，總體積增大，腫脹減輕，嵴數(shù)目及內(nèi)膜面積增大，以中藥高濃度組效果最佳。 7.各組肝、腦線粒體DNA3867bp片段缺失檢測，未發(fā)現(xiàn)缺失的出現(xiàn)。 結(jié)論：以頸部皮下注射D-半乳糖，成功模擬衰老動物模型。人參養(yǎng)榮湯改善高齡期氣血兩虛引發(fā)的諸多退行性體征的作用主要表現(xiàn)在：1.通過提高機體抗氧化酶SOD活性，增強體內(nèi)清除自由基能力；抑制自由基代謝產(chǎn)物