中藥“養(yǎng)肝合劑”聯(lián)合肝細(xì)胞移植對(duì)挽救急性肝衰竭受者生命的技術(shù)研究.pdf

1、目的： 本研究通過(guò)三個(gè)有序的小實(shí)驗(yàn)，分階段探討中藥“養(yǎng)肝合劑”對(duì)進(jìn)行肝細(xì)胞移植的急性肝衰竭大鼠的影響。 實(shí)驗(yàn)一：尋找更接近人類病毒性肝炎誘導(dǎo)的急性肝衰竭動(dòng)物模型，運(yùn)用生化檢測(cè)和病理檢查來(lái)證實(shí)模型的可靠性和穩(wěn)定性； 實(shí)驗(yàn)二：觀察中藥“養(yǎng)肝合劑”對(duì)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的影響； 實(shí)驗(yàn)三：在急性肝衰竭鼠模型的基礎(chǔ)上使用肝細(xì)胞移植合并中藥“養(yǎng)肝合劑”治療，探索急性肝衰竭新的治療方法。 欲通過(guò)本研究為臨床上治療急性

2、肝衰竭提供一個(gè)全新的思路，探索肝細(xì)胞移植結(jié)合中醫(yī)治療急性肝衰竭的新途徑。 方法 實(shí)驗(yàn)一：我們采用了TAA與內(nèi)毒素不同劑量、不同組合方式誘導(dǎo)SD大鼠，構(gòu)建急性肝衰竭的動(dòng)物模型，對(duì)比組間生化檢查及病理檢查結(jié)果；實(shí)驗(yàn)二：運(yùn)用肝細(xì)胞培養(yǎng)及血清藥理學(xué)方法，比較基礎(chǔ)培養(yǎng)液、當(dāng)歸+基礎(chǔ)培養(yǎng)液及養(yǎng)肝合劑+基礎(chǔ)培養(yǎng)液三種不同的培養(yǎng)液對(duì)肝細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖等狀況的作用；實(shí)驗(yàn)三：將按實(shí)驗(yàn)一造模后的80只近交系大鼠隨機(jī)分為三組—移植組、移植+中藥組

3、、對(duì)照組，比較組間存活率和各生化指標(biāo)。 結(jié)果： 實(shí)驗(yàn)一：?jiǎn)渭兌蜹AA及第二次換用內(nèi)毒素均可形成急性肝衰竭的動(dòng)物模型。其中，首日注射3％TAA300mg/kg次日注射內(nèi)毒素5μg/kg的方式造成的急性肝衰竭模型穩(wěn)定，存活窗口期達(dá)48h以上，便于治療性研究的開(kāi)展，是一種相對(duì)理想的動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)二：中藥“養(yǎng)肝合劑”對(duì)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的附壁生長(zhǎng)、增殖速度具有明顯的促進(jìn)作用，并顯著延長(zhǎng)了體外培養(yǎng)的生存時(shí)間，提示“養(yǎng)肝合劑”可能對(duì)肝

4、細(xì)胞發(fā)揮作用具有促進(jìn)作用，形成養(yǎng)肝護(hù)肝效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)三：實(shí)驗(yàn)表明肝細(xì)胞移植雖然不能明顯減輕肝細(xì)胞損傷，但可明顯補(bǔ)償肝細(xì)胞的代謝功能，顯著降低血清直接膽紅素濃度、血氨濃度，提高血清白蛋白的水平，縮短凝血酶原時(shí)間，5天存活率大幅度提高。合用中藥“養(yǎng)肝合劑”后，5天存活率更進(jìn)一步提高，降總膽紅素及血氨濃度，縮短凝血酶原時(shí)間更明顯，而且還可顯著降低血清ALT及AST水平，提示中藥“養(yǎng)肝合劑”合并肝細(xì)胞移植對(duì)挽救急性肝衰竭受者生命具有明顯的治療價(jià)值。