中藥扶正活血化瘀法對腎間質纖維化大鼠腎小管間質中ECM代謝影響的初步研究.pdf

1、目的：采用單側輸尿管結扎(UUO)誘導腎間質纖維化大鼠模型，觀察細胞外基質成分纖維連接蛋白 (Fibronectin，FN)在腎小管損傷及間質纖維化過程中的表達以及中藥扶正活血化瘀法在腎小管損傷及間質纖維化過程中的腎保護作用及可能的作用機制。 方法：雄性Wistar大鼠30只，隨機分為3組：假手術組(Sham group)、模型組(UUO group)、中藥治療組(A group)；假手術組、模型組于術前3天開始每天2ml 蒸餾

2、水灌胃給藥；中藥治療組于術前3天開始每天2ml中藥灌胃給藥；術后21天處死各組大鼠，收集血清測定尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平；術側腎組織10％中性甲醛溶液固定，石蠟包埋切片，以3μm的石蠟切片，常規(guī)行HE、Masson染色，Masson 染色后進行圖像分析以對腎間質纖維化程度進行半定量分析，免疫組化半定量檢測各組大鼠腎組織中 FN 的蛋白表達。 結果：1.腎功能結果：模型組尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平均較假手

3、術組顯著增加，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)；治療組較模型組呈下降趨勢，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)。2.肉眼觀察結果：假手術組腎臟大小形態(tài)正常，顏色暗紅；模型組結扎側腎臟腫大，顏色變淺，有囊性感，內含混濁尿液，腎實質變薄。腎組織行 HE 染色結果顯示：假手術組腎臟組織結構正常，腎小管排列緊密、整齊，小管基底膜光滑連續(xù)，偶見灶性炎細胞浸潤；模型組可見彌漫的腎小管上皮細胞空泡變性、擴張、部分萎

4、縮，偶見壞死，腎間質增寬，大量的炎細胞浸潤和間質纖維化，腎小球病理改變不明顯。治療組上述改變均有所減輕。腎組織行Masson染色結果顯示：假手術組腎臟的膠原染色主要位于腎小球基膜、Bowman 囊、系膜區(qū)和腎小管的毛細血管周圍，而腎小管周圍間質部分則比較狹窄；模型組可見腎問質增寬、有大量膠原纖維增生，腎小球病變不明顯；治療組上述改變均有所減輕。腎間質纖維化圖像分析結果顯示：腎間質膠原染色面積模型組較假手術組明顯增高，兩組間比較有顯著性差

5、異(P<0.05)，治療組較模型組顯著下降，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05)。3.腎組織免疫組織化學：纖維連接蛋白(FN)的蛋白表達分布：假手術組大鼠腎間質有少量表達，染色為顆粒狀，著色稀疏；模型組表達明顯增多，呈不均勻顆粒狀，腎小球表達不明顯；治療組表達較模型組明顯降低。圖像分析結果顯示模型組纖維連接蛋白 (FN)免疫組化陽性染色面積和積分光密度均較假手術組明顯上調，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)；治療組表

6、達均較模型組降低，兩組間比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.05)。4.相關性分析：纖維連接蛋白 (FN)與腎間質纖維化面積均呈顯著正相關。腎間質纖維化面積分別與BUN、Scr 均呈正相關。 結論：1.細胞外基質成分纖維連接蛋白(FN)在單側輸尿管結扎(UUO)，致腎小管損傷及間質纖維化過程中在腎組織中表達顯著增高。2.扶正活血化瘀法組方中藥能降低單側輸尿管結扎 (UUO)大鼠血尿素氮和血肌酐水平，改善了腎功能。3.扶正活血