氧化石墨烯衍生物用作抗腫瘤藥物或pDNA的載體.pdf

1、石墨烯是sp2雜化碳原子形成的單原子層二維原子晶體，厚度為0.35 nm。石墨烯僅含碳原子，不溶于水，經(jīng)氧化可制得氧化石墨烯(GO)。GO含大量羥基和羧基等含氧基團，水溶性好，但因靜電屏蔽效應和非特異性蛋白吸附致使其生理環(huán)境中穩(wěn)定性差，易聚集沉淀，故用作給藥載體需對GO進行修飾。GO經(jīng)表面修飾可提高生物相容性和穩(wěn)定性;靶向配體修飾可增強主動靶向性，提高細胞攝取效率。殼聚糖季銨鹽(TMC)水溶性好，荷正電，可經(jīng)靜電作用結合荷負電的GO。<

2、br>　　本文共價連接靶向配體葉酸(FA)至TMC制得FA修飾的TMC(FTMC);由FTMC非共價修飾GO制得GO-FTMC，分別包載難溶性抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)和質(zhì)粒DNA(pDNA);考察其細胞毒性和細胞攝取。石墨經(jīng)氧化及超聲剝離制得GO粗產(chǎn)物，離心去除未氧化完全及未剝離完全的大片段GO后制得分散性好的GO懸浮液。原子力顯微鏡(AFM)觀察表明GO厚度為0.838 nm;動態(tài)光散射(DLS)測定結果表明GO的粒徑和Zeta電勢

3、分別為87.7 nm和-32.9 mV，粒徑均一。FA經(jīng)酰胺反應共價連接至TMC制得FTMC;核磁共振氫譜(1H NMR)表明FTMC圖譜中7.14、7.76和8.82 ppm處出現(xiàn)FA特征峰，表明FA已連接至TMC。FTMC與GO經(jīng)水浴超聲形成GO-FTMC，厚度為3.038 nm，粒徑和Zeta電勢分別為112.0 nm和30.9 mV。GO-FTMC經(jīng)π-π、疏水和氫鍵相互作用包載DOX制得GO-FTMC-DOX納米復合物，粒徑和

4、Zeta電勢分別為116.1 nm和27.0 mV; GO-FTMC對DOX的載藥量為30.9％，包封率為44.7％。體外釋藥結果表明pH7.4時，DOX的釋放為先突釋后緩釋，24 h累計釋放量為33.3％。調(diào)節(jié)GO與FTMC的質(zhì)量比，包載pDNA，制得8種GO-FTMC-pDNA納米復合物。DLS測定結果表明FTMC與GO的質(zhì)量比從9∶5增至14∶5時，納米復合物的粒徑為120-150nm，Zeta電勢由19 mV增至24 mV。凝膠

5、阻滯結果表明8種GO-FTMC-pDNA納米復合物均可有效縮合pDNA，阻滯pDNA的電泳。水溶性四唑鹽(WST-8)法考察GO-FTMC的細胞毒性;結果表明48 h內(nèi)，0.01-80μg/mL GO-FTMC不影響A549和Hela細胞的增殖。以羅丹明B（RhB）標記GO-FTMC，考察A549和Hela細胞對GO-FTMC的攝取;共聚焦激光掃描顯微鏡(CLSM)觀察結果表明與FA受體低表達的A549細胞相比，F(xiàn)A受體高表達的Hela