芪參方對免疫性肝損傷小鼠Th1-Th2免疫平衡漂移影響的研究.pdf

1、目的:1.文獻研究:檢索近十年來中醫(yī)治療慢性乙型肝炎（以下簡稱慢乙肝）的臨床研究，經過分析統(tǒng)計，探求本病的臨床用藥方面的規(guī)律。2.實驗研究:觀察芪參方對卡介苗(BCG)聯(lián)合脂多糖(LPS)誘導的免疫性肝損傷（Immunological liver injury ILI）小鼠肝細胞損傷的保護作用及免疫調節(jié)功能的影響。
　　方法:1.文獻研究:以《中國期刊全文數據庫》(CNKI)為主庫，檢索年限為2005～2014年，檢索詞為“慢性乙

2、型肝炎”和“中醫(yī)”;建立Excel數據庫，將所納入文獻的藥物依照《中藥學》進行分類，采用頻數統(tǒng)計方法，進行頻率計算。2.實驗研究:將25只C57BL/6小鼠，隨機分為正常組，BCG/LPS模型組，芪參方高、中、低劑量組。除空白組外，各組小鼠尾靜脈注射BCG，并從造模之日起開始灌胃給藥。11天后尾靜脈注射LPS，8h后取血測定血清谷草轉氨酶的(AST)和谷丙轉氨酶（ALT）活性，無菌摘取肝臟和脾臟稱重，計算臟器指數。肝臟HE染色行病理學檢

3、查，脾臟制備淋巴細胞懸液，經佛波酯(PMA)、離子霉素(Io)、莫能霉素刺激后，流式細胞術測定細胞因子白介素4(IL-4)、干擾素-γ（IFN-γ）在CD4+T細胞中的百分比。
　　結果:文獻研究結果:1.補虛類藥、清熱類藥占較高頻率，分別為29.14％、17.62。其中補虛藥中以補氣、補陰、補血藥占比例最高，清熱類藥則是清熱解毒類、清熱涼血類藥物所占比例最高。2.單味中藥的使用以益氣健脾、疏利肝膽、活血化瘀、滋補肝腎藥為主。

4、r>　　實驗研究結果:1.造模結果評價:成功復制了ILI動物模型，動物表現為體重下降，血清ALT、AST升高，細胞因子IFN-γ下降、IL-4升高，病理出現了肝細胞腫脹、炎癥細胞浸潤、局部壞死，符合慢乙肝的臨床特點及發(fā)病機制。該動物模型操作相對簡單，死亡率低，驗模型。2.芪參方對ILI小鼠肝功能、臟器指數及組織病成功率高，成本適宜，為研究慢乙肝較為合適的實理學的研究:血清生化檢測結果表明，給藥后脾臟指數、血清AST、ALT較模型組明顯降

5、低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，肝臟指數較明顯組好轉，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。肝臟組織HE染色結果顯示，模型組較空白組出現了不同程度的炎癥細胞浸潤/庫普氏細胞增生，給藥后較模型組病理有改善，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。3.芪參方對ILI小鼠Th1/Th2的研究:結果顯示空白組較模型組IFN-γ水平下降、IL-4水平升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，芪參方高、中劑量組較模型組IL-4水平下降、IFN-γ水平

6、升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);低劑量組較模型組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　結論:文獻研究結果表明臨床用藥的規(guī)律，也切合了本病病機上的主流觀點:體虛邪戀，濕熱疫毒侵襲。實驗結果表明，芪參方能夠明顯降低轉氨酶水平，改善肝細胞損傷狀態(tài)，顯著的保護肝細胞，可調節(jié)Th1/Th2類細胞因子的分泌水平，表明芪參方在對抗肝細胞損傷方面的作用可能與細胞因子分泌，糾正Th1/Th2平衡漂移，調節(jié)機體免疫功能相關，這一作用可能與劑