芪參方對(duì)免疫性肝損傷小鼠Th1-Th2免疫平衡漂移影響的研究.pdf

1、目的:1.文獻(xiàn)研究:檢索近十年來中醫(yī)治療慢性乙型肝炎（以下簡稱慢乙肝）的臨床研究，經(jīng)過分析統(tǒng)計(jì)，探求本病的臨床用藥方面的規(guī)律。2.實(shí)驗(yàn)研究:觀察芪參方對(duì)卡介苗(BCG)聯(lián)合脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的免疫性肝損傷（Immunological liver injury ILI）小鼠肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及免疫調(diào)節(jié)功能的影響。
　　方法:1.文獻(xiàn)研究:以《中國期刊全文數(shù)據(jù)庫》(CNKI)為主庫，檢索年限為2005～2014年，檢索詞為“慢性乙

2、型肝炎”和“中醫(yī)”;建立Excel數(shù)據(jù)庫，將所納入文獻(xiàn)的藥物依照《中藥學(xué)》進(jìn)行分類，采用頻數(shù)統(tǒng)計(jì)方法，進(jìn)行頻率計(jì)算。2.實(shí)驗(yàn)研究:將25只C57BL/6小鼠，隨機(jī)分為正常組，BCG/LPS模型組，芪參方高、中、低劑量組。除空白組外，各組小鼠尾靜脈注射BCG，并從造模之日起開始灌胃給藥。11天后尾靜脈注射LPS，8h后取血測(cè)定血清谷草轉(zhuǎn)氨酶的(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性，無菌摘取肝臟和脾臟稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。肝臟HE染色行病理學(xué)檢

3、查，脾臟制備淋巴細(xì)胞懸液，經(jīng)佛波酯(PMA)、離子霉素(Io)、莫能霉素刺激后，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞因子白介素4(IL-4)、干擾素-γ（IFN-γ）在CD4+T細(xì)胞中的百分比。
　　結(jié)果:文獻(xiàn)研究結(jié)果:1.補(bǔ)虛類藥、清熱類藥占較高頻率，分別為29.14％、17.62。其中補(bǔ)虛藥中以補(bǔ)氣、補(bǔ)陰、補(bǔ)血藥占比例最高，清熱類藥則是清熱解毒類、清熱涼血類藥物所占比例最高。2.單味中藥的使用以益氣健脾、疏利肝膽、活血化瘀、滋補(bǔ)肝腎藥為主。

4、r>　　實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果:1.造模結(jié)果評(píng)價(jià):成功復(fù)制了ILI動(dòng)物模型，動(dòng)物表現(xiàn)為體重下降，血清ALT、AST升高，細(xì)胞因子IFN-γ下降、IL-4升高，病理出現(xiàn)了肝細(xì)胞腫脹、炎癥細(xì)胞浸潤、局部壞死，符合慢乙肝的臨床特點(diǎn)及發(fā)病機(jī)制。該動(dòng)物模型操作相對(duì)簡單，死亡率低，驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?.芪參方對(duì)ILI小鼠肝功能、臟器指數(shù)及組織病成功率高，成本適宜，為研究慢乙肝較為合適的實(shí)理學(xué)的研究:血清生化檢測(cè)結(jié)果表明，給藥后脾臟指數(shù)、血清AST、ALT較模型組明顯降

5、低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，肝臟指數(shù)較明顯組好轉(zhuǎn)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。肝臟組織HE染色結(jié)果顯示，模型組較空白組出現(xiàn)了不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤/庫普氏細(xì)胞增生，給藥后較模型組病理有改善，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。3.芪參方對(duì)ILI小鼠Th1/Th2的研究:結(jié)果顯示空白組較模型組IFN-γ水平下降、IL-4水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，芪參方高、中劑量組較模型組IL-4水平下降、IFN-γ水平

6、升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);低劑量組較模型組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:文獻(xiàn)研究結(jié)果表明臨床用藥的規(guī)律，也切合了本病病機(jī)上的主流觀點(diǎn):體虛邪戀，濕熱疫毒侵襲。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，芪參方能夠明顯降低轉(zhuǎn)氨酶水平，改善肝細(xì)胞損傷狀態(tài)，顯著的保護(hù)肝細(xì)胞，可調(diào)節(jié)Th1/Th2類細(xì)胞因子的分泌水平，表明芪參方在對(duì)抗肝細(xì)胞損傷方面的作用可能與細(xì)胞因子分泌，糾正Th1/Th2平衡漂移，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能相關(guān)，這一作用可能與劑