活血、行氣和補(bǔ)氣三治法不同配伍比例對(duì)心梗后心血瘀證大鼠心功能和心肌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、[目的]
　　 分析活血、行氣、補(bǔ)氣三因素不同配伍比例對(duì)心梗后心血瘀證大鼠心功能和心肌細(xì)胞凋亡的影響，探討治療心血瘀證大鼠的最佳治療方案，為臨床醫(yī)生科學(xué)組方用藥提供客觀依據(jù)，以提高中醫(yī)藥對(duì)心梗后心血瘀證的臨床療效。
　　 [方法]
　　 采用結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支復(fù)制大鼠心梗心血瘀證模型，參照正交設(shè)計(jì)表四因素（活血法、行氣法、補(bǔ)氣法、空白對(duì)照）三水平（全劑量、1/2劑量、0劑量）分為9組，給以大鼠中藥治療，并設(shè)定模

2、型組和假手術(shù)組。觀察一般情況至灌胃治療2周后，行血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)評(píng)價(jià)大鼠心功能，取心肌組織HE染色光鏡觀察心肌組織的形態(tài)學(xué)變化、電鏡觀察大鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化、TUNEL檢測(cè)心肌細(xì)胞的凋亡指數(shù)，免疫組化檢測(cè)Caspase-3蛋白的表達(dá)情況。
　　 [結(jié)果]
　　 1.一般情況:①術(shù)后1～7天，治療組和模型組大鼠均表現(xiàn)為拱背站立的強(qiáng)迫體位，呼吸急促，毛蓬松豎立，對(duì)外界刺激敏感，易激惹等心血瘀阻實(shí)證表現(xiàn)，并且活動(dòng)量減小，飲

3、食下降，爪背和指甲的顏色呈暗紅色、輕度水腫，與假手術(shù)組相比差別明顯;②術(shù)后8-14天，模型組大鼠漸出現(xiàn)精神萎靡，蜷縮，毛色漸黃，對(duì)外界反應(yīng)稍遲鈍等心氣虛病證，治療組大鼠與其相比癥狀較其減輕，與假手術(shù)組相比還有一定的差別，但各治療組間癥狀差別不明顯;③除假手術(shù)組外，其余各組大鼠臨處死前體重較造模后體重均有所下降。
　　 2.血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)測(cè)定:①與假手術(shù)組比較:模型組大鼠LVSP、±dp/dtmax顯著低于假手術(shù)組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義(P＜0.05或0.01)，LVEDP高于假手術(shù)組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);②與模型組比較:治療組1、2、4和6組大鼠LVSP顯著高于模型組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，LVEDP顯著低于模型組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或0.01)，其余各組與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);治療組1、2組±dp/dtmax顯著高于模型組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其余各組與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.0

5、5)。
　　 3.心肌組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)觀察:
　　 HE染色光鏡下觀察:①假手術(shù)組大鼠心肌排列整齊，細(xì)胞核清晰;②模型組大鼠心肌缺血區(qū)心肌細(xì)胞腫脹，部分細(xì)胞核溶解，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，心室前壁梗死明確，心肌變薄，梗死心肌纖維化;③與模型組相比，治療組大鼠炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少，缺血區(qū)心肌細(xì)胞腫脹減輕，部分細(xì)胞核溶解，心肌細(xì)胞壞死減少，而且治療組大鼠與模型組比較可見(jiàn)大量血管新生。
　　 透射電鏡觀察:①假手術(shù)組的超微結(jié)構(gòu)未

6、見(jiàn)明顯改變;②模型組大鼠可見(jiàn)細(xì)胞存在著大量凋亡，但未見(jiàn)明顯的凋亡小體;③與模型組相比，治療組大鼠心肌肌節(jié)結(jié)構(gòu)較清晰，肌絲斷裂減少，亦可見(jiàn)核膜皺縮，染色質(zhì)凝集，胞漿空泡化等凋亡表現(xiàn)，但凋亡的心肌細(xì)胞數(shù)量較模型組減少。
　　 4.TUNEL檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù):①與假手術(shù)組比較:模型組大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著高于假手術(shù)組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);②與模型組比較:在非梗死區(qū)各治療組大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著低于模型組大鼠，具

7、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或0.01)，在梗死交界區(qū)治療組1、2、3、4、5、6、8組大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著低于模型組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 5.免疫組化檢測(cè)心肌細(xì)胞Caspase-3蛋白的表達(dá)情況:①與假手術(shù)組比較:模型組大鼠心肌Caspase-3的表達(dá)顯著高于假手術(shù)組大鼠，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;②與模型組比較:各治療組大鼠在非梗死區(qū)和梗死交界區(qū)心肌Caspase-3的表達(dá)顯著低于模型組大鼠，

8、具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 6.采用全劑量活血法、全劑量補(bǔ)氣法、全劑量或半劑量行氣法，對(duì)改善心功能療效最好，且各因素對(duì)療效的影響從大到小排列為活血法/補(bǔ)氣法＞行氣法。
　　 7.采用全劑量活血法、半劑量行氣法、全劑量補(bǔ)氣法，對(duì)抑制心肌細(xì)胞凋亡療效最好，且各因素對(duì)療效的影響從大到小排列為活血法＞補(bǔ)氣法＞行氣法。
　　 [結(jié)論]
　　 1.活血、行氣、補(bǔ)氣三治法治療心梗后心血瘀證大鼠療效肯定，它能

9、減輕心肌細(xì)胞腫脹，抑制其凋亡，改善心功能，對(duì)心梗后心肌細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用。
　　 2.活血法、行氣法和補(bǔ)氣法三因素對(duì)治療心血瘀證大鼠療效的影響不同，影響心功能的因素從大到小排列為活血法/補(bǔ)氣法＞行氣法，影響心肌細(xì)胞凋亡的因素從大到小排列為活血法＞補(bǔ)氣法＞行氣法。
　　 3.通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，得出改善心功能的最佳方案為:全劑量活血法、全劑量補(bǔ)氣法+全劑量或半劑量行氣法;抑制心肌細(xì)胞凋亡的最佳方案為:全劑量活血法、半