活血、行氣和補(bǔ)氣三治法對(duì)心梗大鼠左室非梗死區(qū)心肌組織PKC、ERK1、ERK2蛋白表達(dá)水平的影響.pdf

1、[目的]
　　 觀察活血、行氣和補(bǔ)氣三治法對(duì)心梗大鼠用藥2周后心臟形態(tài)、重量、舒縮功能變化的影響，探討PKC、ERK1、ERK2蛋白在心室重構(gòu)過(guò)程中的作用及中藥的影響，進(jìn)一步闡明活血、行氣和補(bǔ)氣三治法抗大鼠心梗后心室重構(gòu)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，比較三治法在心梗大鼠的治療中如何恰當(dāng)組合才能發(fā)揮更好療效，為科學(xué)組方用藥提供客觀依據(jù)，切實(shí)提高中藥臨床療效。
　　 [方法]
　　 SD雄性大鼠160只，采用左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎法

2、建立大鼠心血瘀阻證心梗模型，術(shù)后第二天存活大鼠納入實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分組:假手術(shù)組（10只），模型組（15只），治療組9組（各15只）。治療組每日中藥水煎溶液灌胃(10g/kg·d，每日一次，持續(xù)2周)，模型組和假手術(shù)組每日灌胃（相同劑量的生理鹽水）。觀察一般情況至術(shù)后2周，行血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)大鼠心功能;電子天平稱量大鼠體重及左心室重量，計(jì)算左室重量指數(shù)(LVWI);心肌石蠟切片標(biāo)本行蘇木精-伊紅染色;大鼠左室交界區(qū)心肌組織行透射電鏡觀察;Wes

3、tern Blot法檢測(cè)各組大鼠左室非梗死區(qū)心肌組織PKC、ERK1、ERK2蛋白的含量。
　　 [結(jié)果]
　　 1.一般情況
　　 術(shù)后1～7d，假手術(shù)組大鼠拱背站立體位基本消失，活動(dòng)量、飲食明顯增加;治療組和模型組大鼠均表現(xiàn)為拱背站立的強(qiáng)迫體位，對(duì)外界刺激敏感，易激惹，活動(dòng)量、飲食下降。術(shù)后8～14d，假手術(shù)組大鼠恢復(fù)術(shù)前狀態(tài);治療組大鼠拱背站立體位基本消失，活動(dòng)量、飲食增加，但有輕度的水腫;模型組大鼠拱背站

4、立體位基本消失，活動(dòng)量、飲食與治療組大鼠相比較差。
　　 2.各組大鼠血流動(dòng)力學(xué)變化
　　 模型組大鼠LVSP、±dp/dtmax明顯低于假手術(shù)組(P＜0.01VS假手術(shù)組)，LVEDP則高于假手術(shù)組(P＜0.01VS假手術(shù)組)。治療組1、2、4組LVEDP低于模型組(P＜0.05VS模型組)，組間比較無(wú)差異(P＞0.05)。治療組1、2、4、5、6組+dp/dtmax高于模型組(P＜0.01VS模型組)，組間比較無(wú)差異

5、(P＞0.05)。治療組1組-dp/dtmax高于模型組(P＜0.05VS模型組)，2、4、5、6組與模型組-dp/dtmax比較無(wú)差異(P＞0.05VS模型組)。
　　 3.各組大鼠左室重量指數(shù)(LVWI)的變化
　　 模型組大鼠LVWI明顯大于假手術(shù)組(P＜0.01VS假手術(shù)組)。治療組1、2、3、4、5、6、7、8組LVWI小于模型組(P＜0.01VS模型組)。治療組1、2、4組LVWI小于9組(P＜0.05），1

6、、2、4組組間比較無(wú)差異（P＞0.05）。
　　 4.心臟組織病理學(xué)及超微結(jié)構(gòu)觀察
　　 假手術(shù)組大鼠心肌排列整齊，染色均勻一致;模型組大鼠肌絲排列紊亂且極度疏松，線粒體腫脹、脊紊亂或消失;治療組大鼠肌絲排列較為有序。
　　 5.各組大鼠心肌組織PKC、ERK1、ERK2蛋白表達(dá)水平的變化
　　 5.1假手術(shù)組大鼠PKC、ERK1、ERK2表達(dá)量極少。模型組大鼠PKC、ERK1、ERK2表達(dá)量顯著升高，大

7、于假手術(shù)組(P＜0.01VS假手術(shù)組)。
　　 5.2治療組1、2、4組PKC表達(dá)量與模型組比較顯著降低(P＜0.05VS模型組)，1、2、4組組間比較沒(méi)有差異(P＞0.05)。
　　 5.3治療組1到9組ERK1表達(dá)量與模型組比較顯著降低(P＜0.01VS模型組)。治療組1、2、4、5組間比較:1、2組ERK1與4、5組比較有顯著差異(P＜0.05)，1組和2組比較沒(méi)有差異(P＞0.05)，4組和5組比較沒(méi)有差異(P＞

8、0.05)。
　　 5.4治療組1組至9組ERK2表達(dá)量與模型組比較顯著降低(P＜0.01VS模型組)。治療組1、2、3、4、5、6、9組間比較:1、2、4、5、6組ERK2與3、9組比較有顯著差異(P＜0.05)，1、2、4、5、6組組間比較沒(méi)有差異(P＞0.05)，3組和9組組間比較沒(méi)有差異(P＞0.05)。
　　 6.比較各組大鼠PKC、ERK1、ERK2蛋白之間的相關(guān)性以及與LVWI和血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的相關(guān)性。

9、r>　　 PKC與ERK1、ERK2顯著相關(guān)（r=0.8795，r=0.7680）;PKC與LVWI、LVEDP顯著相關(guān)（r=0.7507，r=0.7760）;ERK1與LVWI、LVEDP顯著相關(guān)(r=0.6256，r=0.7233); ERK2與LVWI、LVEDP顯著相關(guān)（r=0.8083，r=0.6189）。
　　 [結(jié)論]
　　 1.心梗大鼠心肌組織PKC、ERK1、ERK2蛋白的高表達(dá)現(xiàn)象，提示PKC、ER

10、K1、ERK2蛋白可能參與了心梗后心室重構(gòu)的過(guò)程。
　　 2.中藥治療可改善大鼠心功能，保持心肌細(xì)胞正常形態(tài)結(jié)構(gòu)，抑制心肌肥厚。
　　 3.中藥治療能顯著降低PKC、ERK1、ERK2蛋白的表達(dá)水平，分子機(jī)制可能為中藥阻斷了PKC-ERK1/ERK2這條信號(hào)通路介導(dǎo)的心室重構(gòu)。
　　 4.九組治療組中活血、行氣和補(bǔ)氣三治法全劑量改善心梗氣虛血瘀證大鼠心功能、左室重量指數(shù)及鏡下結(jié)構(gòu)的效果最好。全劑量活血藥配合半劑量