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1、石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文HC2檢測(cè)高危型HPV在宮頸病變中的應(yīng)用姓名:劉娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師:王英紅20100606HC2檢測(cè)高危型HPV在宮頸病變中的應(yīng)用2研究對(duì)象與方法(Researchobjects&Methods)一、一、研究對(duì)象研究對(duì)象選擇2009年1月~2010年1月在石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院一附院就診的1236例有性生活、意愿行宮頸癌篩查、或?qū)m頸病變治療后隨診的婦女為研究對(duì)象?;颊吣挲g23~74歲中位年齡(42
2、)歲,進(jìn)行醫(yī)生取材的宮頸細(xì)胞學(xué)檢查(包括傳統(tǒng)的宮頸刮片和或TCT)及HRHPVDNA檢測(cè),詢(xún)問(wèn)患者年齡、文化程度、結(jié)婚年齡、妊娠次數(shù)、產(chǎn)次、人流次數(shù)、經(jīng)陰道分娩次數(shù)、首次經(jīng)陰道分娩時(shí)年齡,有何臨床癥狀。婦科檢查記錄宮頸外觀(guān),排除陰道流血量多者,近3日內(nèi)無(wú)陰道用藥史、無(wú)性生活,如陰道分泌物多,先用無(wú)菌大棉球拭去,再采集標(biāo)本。對(duì)需要實(shí)施相關(guān)治療者,進(jìn)行相應(yīng)治療,并進(jìn)行治療后隨診。二、研究方法二、研究方法2.1標(biāo)本采集先行宮頸細(xì)胞學(xué)取樣,然后
3、行HRHPV取樣。采集方法:窺器暴露宮頸,液基細(xì)胞學(xué)取樣:使用液基細(xì)胞學(xué)系統(tǒng)專(zhuān)用刷插入宮頸管口旋轉(zhuǎn)35周將采樣刷頭部放入裝有Cytich保存液的小瓶?jī)?nèi)涮洗,收集宮頸表面及頸管的脫落上皮細(xì)胞遺棄刷頭,蓋好瓶蓋,做好標(biāo)記,送檢,標(biāo)本經(jīng)ThinPrep2000系統(tǒng)程序化處理,制片、固定、染色。宮頸刮片取樣,具體方法:將木刮片圍繞宮頸外口旋轉(zhuǎn)數(shù)周,將刮出物均勻涂抹在玻片上95%酒精固定15~20min巴氏染色。HRHPV取樣:將專(zhuān)用采樣刷置于宮
4、頸管內(nèi)注意避免全部插入宮頸管內(nèi),逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)3圈并停留10s,將采樣刷放入專(zhuān)用的標(biāo)本儲(chǔ)存瓶里沿折痕折斷采樣刷多余桿部將采樣刷留在標(biāo)本儲(chǔ)存瓶里蓋好蓋子避免采樣刷接觸其它物品,造成污染,作好標(biāo)記儲(chǔ)存于4℃冰箱,3周內(nèi)檢測(cè)。2.2試劑與儀器檢測(cè)HRHPVDNA采用美國(guó)Digene公司制造的雜交捕獲2代(HC2)基因雜交信號(hào)放大系統(tǒng)測(cè)定試劑盒購(gòu)于上海萊特公司。液基細(xì)胞學(xué)采用美國(guó)CYTCY公司ThinPrep2000System。陰道鏡采用美國(guó)偉
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