江蘇省水稻惡苗病菌對咪鮮胺和氰烯菌酯的抗藥性監(jiān)測及其敏感性分析.pdf

1、本文從江蘇省的姜堰、靖江、常州采集了水稻惡苗病莖葉樣本91份。樣本經(jīng)初篩、單孢分離、ITS序列擴(kuò)增和比對分析，共獲得鐮刀菌149株，其中Fusarium fujikuroi77株，F(xiàn).graminearum36株，F(xiàn).equiseti28株，F(xiàn).asiaticum8株。在分離的77株F.fujikuroi中，靖江地區(qū)15株，占該地區(qū)種群的30.0％，常州地區(qū)43株，占該地區(qū)菌群的76.8％;姜堰地區(qū)19株，占該地區(qū)種群的44.2％。在分

2、離的鐮刀菌中，F(xiàn).fujikuroi占整個菌群的51.68％。
　　將水稻種子利用水稻惡苗病菌的孢子液處理后，通過對水稻種子發(fā)芽率的統(tǒng)計和植株徒長率的比較，發(fā)現(xiàn)菌株81-1孢子液處理的水稻種子的發(fā)芽率最低，為22.22％，菌株37-3孢子液處理的水稻種子的發(fā)芽率最高，達(dá)到80.00％。病原菌孢子液處理后，97.44％的水稻苗表現(xiàn)植株徒長，徒長率從4.10％到61.14％不等，徒長率最高的是菌株1-1處理后的植株。只有經(jīng)菌株54-1

3、孢子液處理的種子長大后的植株表現(xiàn)矮化現(xiàn)象。靖江和姜堰地區(qū)60％以上的水稻種子的發(fā)芽率在35.00％-70.00％之間，而常州地區(qū)大約56％的水稻種子的發(fā)芽率在70.00％-100.00％之間。靖江、姜堰和常州地區(qū)70％以上的植株的徒長率在15.00％-40.00％之間，這都說明分離到的惡苗病菌具有不同程度的致病性。
　　通過菌絲生長速率法檢測了77株水稻惡苗病菌對咪鮮胺的抗藥性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)咪鮮胺對病原菌的EC50為0.0196-1.

4、3329μg/mL，EC50最大值約為最小值的68倍。靖江地區(qū)抗藥性最低，EC50的平均值為0.1589μg/mL;常州抗藥性最高，EC50的平均值為0.2529μg/mL;姜堰地區(qū)EC50的平均值為0.2021μg/mL。通過抗性倍數(shù)計算，發(fā)現(xiàn)分離到的菌株中具有抗性的菌株占22.08％。這說明水稻惡苗病菌對咪鮮胺已經(jīng)產(chǎn)生了一定程度的抗性。
　　對脫甲基酶CYP51的基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增:與菌株30-2（敏感菌株）相比，菌株54-3

5、（抗性菌株）的cyp51A基因第38位的堿基由T變化為G，即與敏感性菌株相比，抗性菌株的cyp51 A基因的第13位密碼子編碼的氨基酸由纈氨酸(Val)變化為甘氨酸(Gly)，而這一變化可能是菌株產(chǎn)生抗藥性的原因。
　　利用菌絲生長速率法檢測了77株水稻惡苗病菌對氰烯菌酯的敏感性。結(jié)果表明:氰烯菌酯對水稻惡苗病菌的EC50為0.0124～2.0400μg/mL，76株菌株的抗藥性頻率呈連續(xù)的單峰分布，EC50均值為0.6838μg