酶解技術(shù)在海洋源脂肪酸及肝素提取中的應(yīng)用.pdf

1、酶解技術(shù)是天然活性物質(zhì)提取中的重要手段，較傳統(tǒng)堿解、酸解、鹽解等具有節(jié)能減排的優(yōu)勢。本論文采用蛋白酶解、蛋白酶與自溶酶復(fù)合酶解及固定化酶解技術(shù)分別對金槍魚肝油、南極磷蝦油及肝素鈉進(jìn)行了提取工藝研究。主要內(nèi)容包括：
　　1）以二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為指標(biāo)，對木瓜蛋白酶酶解金槍魚肝，提取金槍魚肝油工藝進(jìn)行了探討。在單因素實(shí)驗基礎(chǔ)上，通過響應(yīng)面實(shí)驗確定了最佳提取工藝條件：料液比1∶1.5 g/mL，

2、pH6.0，酶解時間2.4 h，酶解溫度41℃，加酶量0.5％。該條件下，所得金槍魚肝油中EPA與DHA質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為56.07%。
　　2）采用木瓜蛋白酶對南極磷蝦油進(jìn)行提取，探索自溶酶體系在南極磷蝦油提取過程中的作用。結(jié)果表明：南極磷蝦自溶作用有利于南極磷蝦油的提取，木瓜蛋白酶結(jié)合自溶酶體系共同作用可取得最佳提取效果。以EPA與DHA質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為檢測指標(biāo)，探討了不同酶解溫度、料液比、加酶量、酶解時間和pH對南極磷蝦油提取效果

3、的影響。先通過單因素實(shí)驗，再通過正交實(shí)驗，分析確定了最佳提取工藝條件：酶解溫度50℃，料液比1∶22 g/mL，加酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.25%，酶解時間2 h，pH7.0。在此條件下提取的蝦油，EPA和DHA質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為75.77%。
　　3）探索了胰蛋白酶的固定化方法及其對小腸黏膜的酶解作用，并與游離胰蛋白酶對小腸黏膜的酶解作用進(jìn)行了比較。結(jié)果顯示，最佳胰蛋白酶固定條件：以粒徑15±5 nm二氧化硅為固定載體，酶與載體質(zhì)量比為1∶25

4、，常溫下固定2 h；所得固定化酶與游離酶溫度穩(wěn)定范圍一致，但pH穩(wěn)定范圍向堿性偏移；固定化酶對小腸黏膜的酶解作用與游離酶對小腸黏膜的酶解作用相比，兩者最佳提取條件及所得肝素效價接近。同時，在單因素試驗基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面分析法，以肝素效價為響應(yīng)值，通過考察pH、加酶量、酶解溫度及料液比，進(jìn)一步優(yōu)化了固定化胰蛋白酶酶解制備肝素的工藝，建立了二次回歸方程。方差分析結(jié)果表明：pH、酶解溫度對肝素提取影響極顯著，加酶量、料液比對肝素提取影響顯著；最