幾種中藥小分子與牛血清白蛋白的相互作用研究.pdf

1、藥物小分子與血清白蛋白之間的相互作用研究對闡明藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運、分配及代謝過程、解釋蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系以及開發(fā)新藥等都有重要意義，近年來引起廣泛關(guān)注。本文主要研究了幾種中藥小分子與牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）的相互作用，選擇常見的有代表性的白藜蘆醇和黃酮類化合物，研究中藥小分子與BSA相互作用的結(jié)構(gòu).結(jié)合力關(guān)系及金屬離子對中藥小分子與BSA相互作用的影響。主要研究內(nèi)容如下： （1）采用多種

2、光譜手段對白藜蘆醇與BSA的相互作用進行研究，構(gòu)建中藥小分子與BSA相互作用信息體系，為后續(xù)研究奠定理論框架和實驗基礎(chǔ)。通過熒光淬滅光譜判定白藜蘆醇對BSA的淬滅類型主要為靜態(tài)淬滅，在293.15K、303.15K和313.15K時白藜蘆醇與BSA的表觀結(jié)合常數(shù)分別為1.95×106、1.70×106和1.65×106L·mol-1，隨著溫度的升高而降低；通過熒光光譜與UV-Vis光譜結(jié)合得到分子間結(jié)合的空間距離；由熱力學(xué)方程計算得到白

3、藜蘆醇與BSA分子間結(jié)合過程的熱力學(xué)參數(shù)，判定主要作用力是靜電作用，反應(yīng)是自發(fā)過程；同步熒光掃描結(jié)果表明白藜蘆醇使BSA的色氨酸殘基及酪氨酸殘基微環(huán)境發(fā)生改變；共振光散射及紅外光譜法研究表明白藜蘆醇使BSA二級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，且形成了白藜蘆醇-BSA配合物，導(dǎo)致BSA熒光的淬滅。 （2）通過熒光光譜法考察兩種黃酮及其黃酮苷與BSA的相互作用，探討中藥小分子與BSA相互作用的結(jié)構(gòu)與結(jié)合力關(guān)系。研究結(jié)果表明，大豆苷元、大豆苷、染料木素

4、和染料木苷的表觀結(jié)合常數(shù)分別為2.72×105、1.91×104、1.22×106和3.35×104 L·mol-1。黃酮母環(huán)上羥基被糖苷取代后將削弱其與BSA的作用，導(dǎo)致其與牛血清白蛋白的結(jié)合常數(shù)降低1～2個數(shù)量級。推斷黃酮母環(huán)上羥基被糖苷取代后使黃酮分子體積變大，引起空間結(jié)構(gòu)變化，從而阻礙了與BSA氨基酸殘基的作用，使其與BSA的作用減弱。 （3）通過熒光光譜法考察了鋅離子對B環(huán)羥基數(shù)目不同的黃酮類中藥小分子與BSA結(jié)合過程

5、的影響。未加入鋅離子時高良姜素、山奈酚、槲皮素和楊梅素與BSA的表觀結(jié)合常數(shù)分別為1.08×106、5.08×106、3.70×107、2.15×108 L·mol-1，加入鋅離子后分別為3.09×105、2.18×105、1.3×105、7.40×104 L·mol-1。鋅離子的加入使高良姜、山奈酚、槲皮素和楊梅素與BSA的表觀結(jié)合常數(shù)與結(jié)合位點數(shù)降低，且隨著黃酮B環(huán)羥基數(shù)目的增加，鋅離子的影響越明顯。推斷可能是由于黃酮醇與鋅離子生成