慢性扁桃體炎對機體免疫功能的影響和機制研究.pdf

1、本研究分為五部分：
　　 第一部分：慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞免疫狀態(tài)和功能變化的研究
　　 目的：探討慢性扁桃體炎對外周血單個核細胞免疫狀態(tài)和功能的影響。
　　 方法：分離慢性扁桃體炎組和健康對照組外周血單個核細胞，采用噻唑藍（MTT）試驗檢測細胞的增殖能力，流式細胞術檢測細胞周期變化和凋亡情況，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測細胞分泌細胞因子的能力，同時檢測細胞活性狀態(tài)和吞噬功能的變化。
　　

2、 結果：慢性扁桃體炎組患者外周血單個核細胞的增殖能力和細胞周期與健康對照組無顯著性差異（P>0.05）；但慢性扁桃體炎組患者外周血單個核細胞較健康對照組凋亡增加（P<0.05），細胞因子分泌能力增強（P<0.05）而細胞活性降低且吞噬功能減弱（P<0.05）。
　　 結論：慢性扁桃體炎影響患者外周血單個核細胞的免疫狀態(tài)和功能，能使細胞凋亡增加，細胞因子分泌能力異常增強，但同時使細胞活性降低且吞噬功能減弱。
　　 第二部分

3、：慢性扁桃體炎患者外周血T淋巴細胞亞群的分析研究
　　 目的：探討慢性扁桃體炎患者外周血T淋巴細胞各亞群的變化特點。
　　 方法：采用流式細胞儀檢測54例慢性扁桃體炎患者和52例健康志愿者的外周血初始T細胞、功能T細胞、激活T細胞及凋亡T細胞亞群百分比，并結合血清胱抑素(Cystatin C)、ASO和ESR 水平進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果：慢性扁桃體炎患者外周血CD3+T細胞、CD3+CD8+T細胞、CD4+

4、CD28+T細胞、CD8+CD28+T細胞、CD4+HLA-DR+T細胞、CD8+HLA-DR+T細胞、CD8+CD95+T細胞與健康對照組相應細胞亞群之間的差異無顯著性意義(P>0.05)。但CD4+T細胞、CD4+CD45RA+T細胞和CD4+CD25+T細胞減少，CD4+CD45RO+T細胞、CD8+CD38+T細胞和CD4+CD95+T細胞增加,CD4+/CD8+和CD4+CD45RA+/CD4+CD45RO+比值下降，與健康對

5、照組相應細胞亞群之間的差異有顯著性意義(P<0.05)。慢性扁桃體炎患者的外周血CD4+CD45RA+T細胞百分比與其血清Cystatin C濃度呈負相關。
　　 結論：本研究通過對外周血各T細胞亞群變化特點的系統(tǒng)研究，證實了慢性扁桃體炎患者機體存在T細胞免疫平衡紊亂。CD4+CD45RA+T細胞的變化與慢性扁桃體炎患者腎損害密切相關。
　　 第三部分：慢性扁桃體炎患者外周血趨化因子表達變化的研究
　　 目的：研

6、究慢性扁桃體炎患者外周血趨化因子的表達變化情況，及其趨化因子水平與臨床指標之間的關系。
　　 方法：ELISA法檢測慢性扁桃體炎組和健康對照組血清中白細胞介素-8（interleukin-8，IL-8）、生長相關基因產(chǎn)物-α（growth-related gene product-α,GRO-α）、粒細胞趨化蛋白-2（granulocyte chemotactic protein-2，GCP-2）和單核細胞趨化蛋白-1（mono

7、cyte chemoattractant protein-1，MCP-1）表達水平并進行比較。探討分析慢性扁桃體炎患者外周血趨化因子水平與抗鏈球菌溶血素O (antistreptolysinO，ASO)、紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）和血清半胱氨酸蛋白酶抑制劑C（Cystatin C）之間的關系。ROC 曲線分析血清IL-8、GRO-α、GCP-2和MCP-1 診斷慢性扁桃體炎腎損害

8、的參考價值。
　　 結果：慢性扁桃體炎組患者外周血血清IL-8、GRO-α和MCP-1表達水平較健康對照組高（P<0.05），GCP-2表達水平在兩組之間無顯著性差異（P>0.05）。慢性扁桃體炎組患者外周血血清IL-8表達水平與ESR 呈正相關（r=0.475，P<0.01）并且與血清Cystatin C 水平呈正相關（r=0.314,P<0.05），MCP-1表達水平與血清Cystatin C水平呈正相關（r=0.703，P

9、<0.01）。扁桃體切除術后一月，慢性扁桃體炎組患者外周血血清IL-8、GRO-α、GCP-2、MCP-1和Cystatin C表達水平均較術前有顯著下降（P<0.05）。經(jīng)ROC 曲線分析及檢驗比較，MCP-1 診斷腎功能損害的最佳截值為516 pg/ml，敏感性為100%，特異性為82.93%，對慢性扁桃體炎腎損害診斷有一定的參考價值。
　　 結論：慢性扁桃體炎使患者血清趨化因子表達水平升高，而手術治療可顯著降低其血清趨化因

10、子表達水平。其中血清MCP-1表達水平與腎功能損害相關，具有一定的診斷參考價值。
　　 第四部分：慢性扁桃體炎激活外周血單個核細胞NF-κB信號途徑升高單核細胞趨化蛋白-1表達的研究
　　 目的：研究慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞分泌MCP-1增高的機制。
　　 方法：分離培養(yǎng)慢性扁桃體炎組和健康對照組外周血單個核細胞，ELISA法檢測外周血單個核細胞培養(yǎng)上清中MCP-1的表達，RT-PCR法檢測外周血單個核細

11、胞MCP-1 mRNA的表達，Western Blot檢測外周血單個核細胞胞漿和胞核中IκB、p-IκB、NF-κB的表達。同時，給予TNF-α或PDTC，比較上述各指標的表達變化情況。
　　 結果：慢性扁桃體炎組患者外周血單個核細胞分泌MCP-1 較健康對照組顯著增加（P<0.05）。慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞胞漿中IκB表達減少，p-IκB表達增加，從而使其NF-κB活化，在胞漿表達減少，同時在胞核表達增加，導致MCP

12、-1 mRNA表達增加，MCP-1 蛋白產(chǎn)生及分泌增高（P<0.05）。給予TNF-α培養(yǎng)，顯著激活NF-κB信號途徑，MCP-1 mRNA表達顯著增加，慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞分泌MCP-1 顯著增加（P<0.05）。反之，給予PDTC培養(yǎng)，顯著抑制NF-κB信號途徑，MCP-1 mRNA表達顯著減少，慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞分泌MCP-1 顯著減少（P<0.05）。
　　 結論：慢性扁桃體炎患者外周血單個核細

13、胞通過活化NF-κB信號轉導途徑增加MCP-1的表達。
　　 第五部分：慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞MCP-1受體CCR2的表達及其相互作用研究
　　 目的：研究慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞CCR2表達情況，以及MCP-1與CCR2的相互作用情況。
　　 方法：分離慢性扁桃體炎組和健康對照組外周血單個核細胞，RT-PCR檢測外周血單個核細胞CCR2 mRNA表達情況；Western Blot定量檢測檢測外

14、周血單個核細胞CCR2蛋白水平表達情況；免疫組化定位CCR2表達情況；趨化試驗檢測MCP-1與CCR2相互作用情況。
　　 結果：慢性扁桃體炎組外周血單個核細胞CCR2 mRNA和蛋白表達均較健康對照組高（P<0.05）。CCR2在慢性扁桃體炎患者外周血單個核細胞胞膜上強陽性表達。MCP-1對CCR2陽性外周血單個核細胞有趨化作用，且呈濃度依賴性增強。抗CCR2抗體能抑制外周血單個核細胞的趨化運動。
　　 結論：慢性扁桃