水稻RDR1(OsRDR1)在水稻條紋病毒侵染過程中的作用初探.pdf

1、真核生物中，小RNA介導(dǎo)的基因沉默通過調(diào)控基因表達(dá)參與宿主的生長發(fā)育以及對(duì)生物和非生物逆境的響應(yīng)。
　　大量的研究表明真核生物細(xì)胞中的Argonautes(AGOs)、Dicers(DCRs)、Dicer-like(DCLs)與RNA-dependent RNAPolymerases(RdRPs)等是基因沉默過程中的關(guān)鍵組份。在雙子葉植物中，RdRP參與RNA沉默或抗病毒途徑，但其在水稻中的功能則了解得較少。在本研究中，我們擴(kuò)增并

2、克隆了水稻RDR1(OsRDR1)基因并測(cè)定了其序列。序列分析表明該基因共含有5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子。實(shí)時(shí)定量分析表明OsRDR1基因的表達(dá)受水稻條紋病毒(rice stripe virus，RSV)侵染誘導(dǎo)，推測(cè)其功能可能與水稻抗病毒特性相關(guān)。接著，我們通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了水稻轉(zhuǎn)座子Tos17插入突變體株系ND2001即為Osrdr1突變體，PCR和RT-PCR結(jié)果一致表明該突變體中OsRDR1已被完全敲除了。之前的研究已表明該突變體水稻植

3、株比野生型水稻對(duì)RSV更敏感。為了進(jìn)一步探索OsRDR1基因在水稻抗病毒過程中的功能，本研究又應(yīng)用高通量測(cè)序技術(shù)分析和比較RSV感染的野生型和突變體水稻植株中RSV來源的小RNA(vsRNAs)。結(jié)果表明RSV侵染后，突變體和野生型水稻植株都產(chǎn)生了大量的vsRNAs，而且這些vsRNA均能很好地與RSV正義鏈或反義鏈RNA1-4的序列匹配，但是與野生型水稻相比，Osrdr1突變體植株中的vsRNA數(shù)量顯著減少。
　　這些結(jié)果表明O