腺樣囊性癌細胞對雪旺氏細胞的誘向作用及神經(jīng)營養(yǎng)素在該過程中的作用.pdf

1、涎腺腺樣囊性癌(adenoidcysticcarcinoma，ACC)具有嗜神經(jīng)侵襲的特性，多年來研究這類腫瘤嗜神經(jīng)侵襲的特性以關(guān)注癌細胞對于神經(jīng)組織特異性的趨化移動、黏附為主，近來一些研究發(fā)現(xiàn)該類腫瘤先誘導神經(jīng)纖維或神經(jīng)元軸突向腫瘤趨化生長，繼而發(fā)生嗜神經(jīng)侵襲；上述嗜神經(jīng)性腫瘤一般侵犯外周神經(jīng)，但外周神經(jīng)軸突之外包有髓鞘，形成髓鞘的雪旺氏細胞是否直接對嗜神經(jīng)性侵襲有影響及神經(jīng)營養(yǎng)素在該過程中的作用目前尚無報道。 目的：觀察并探

2、討腺樣囊性癌細胞對雪旺氏細胞生長、遷移的影響，了解神經(jīng)營養(yǎng)素在其間的作用，為研究ACC嗜神經(jīng)侵襲的機制，控制ACC對神經(jīng)的侵襲提供理論依據(jù)。 方法：1.制備腺樣囊性癌細胞SACC-83細胞與坐骨神經(jīng)共培養(yǎng)細胞玻片，并行S100免疫組化染色實驗，以確定坐骨神經(jīng)培養(yǎng)出的細胞為雪旺氏細胞2.采用細胞培養(yǎng)技術(shù)將腺樣囊性癌細胞SACC-83細胞、舌癌細胞TCA-8113及小鼠肺纖維細胞L929細胞分別與小鼠坐骨神經(jīng)共培養(yǎng)并設(shè)空白對照組，觀

3、察并探討腺樣囊性癌細胞對雪旺氏細胞生長、遷移的影響；3.將經(jīng)神經(jīng)營養(yǎng)素的高親和受體Trk特異性阻斷劑K252a預處理的小鼠坐骨神經(jīng)與腺樣囊性癌細胞共培養(yǎng)，觀察K252a在腺樣囊性癌細胞對雪旺氏細胞生長、遷移影響中的作用；4.利用侵襲小室觀察SACC-83細胞對雪旺氏細胞趨化、移動能力的影響；5.利用侵襲小室觀察不同神經(jīng)營養(yǎng)素對雪旺氏細胞趨化、移動能力的影響。6.利用侵襲小室觀察K252a在神經(jīng)營養(yǎng)素對雪旺氏細胞趨化、移動能力影響中的作用

4、。 結(jié)果：1.經(jīng)S100免疫組化染色，腺樣囊性癌細胞SACC-83細胞與坐骨神經(jīng)共培養(yǎng)中坐骨神經(jīng)生長出的細胞多數(shù)為長梭形的細胞，染色陽性，為雪旺細胞；少數(shù)為多邊形的細胞染色陰性，為成纖維細胞。2.坐骨神經(jīng)與腺樣囊性癌細胞共培養(yǎng)中由小鼠坐骨神經(jīng)長出的雪旺氏細胞向腺樣囊性癌細胞群落生長、遷移，表現(xiàn)出趨化性，與腺樣囊性癌細胞共培養(yǎng)可促進雪旺氏細胞生長；TCA-8113細胞及L929細胞對雪旺氏細胞無誘向及促進生長作用；3.將經(jīng)神經(jīng)營養(yǎng)

5、素的高親和受體Trk特異性阻斷劑K252a預處理的小鼠坐骨神經(jīng)與腺樣囊性癌細胞共培養(yǎng)，由小鼠坐骨神經(jīng)長出的雪旺氏細胞喪失趨化性及細胞生長未被促進；4.與空白對照組比較，SACC-83細胞可顯著促進雪旺氏細胞向侵襲小室下室趨化、移動，而TCA-8113細胞及L929細胞沒有促進雪旺氏細胞向侵襲小室下室趨化、移動的作用；5.與空白對照組比較，神經(jīng)生長因子(nervegrowthfactor，NGF)、神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(neurotrophi

6、n-3，NT-3)可顯著促進雪旺氏細胞向侵襲小室下室趨化、移動，而腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)沒有促進雪旺氏細胞向侵襲小室下室趨化、移動的作用。6.經(jīng)K252a預處理后，NGF及NT-3對雪旺氏細胞向下室趨化移動的促進作用被阻斷，故從反面說明神經(jīng)營養(yǎng)素在雪旺氏細胞神經(jīng)趨化性中起重要作用。 結(jié)論：1.首次提出由外周神經(jīng)長出的雪旺氏細胞向腺樣囊性癌細胞趨化性生長，且與