非諾貝特對碘酸鈉誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜變性的保護(hù)作用.pdf

1、目的：研究非諾貝特在碘酸鈉誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜變性的保護(hù)作用，并探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法：
　?。?）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：選取人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞穩(wěn)定細(xì)胞系（ARPE-19），采用不同濃度碘酸鈉刺激細(xì)胞，確定本實(shí)驗(yàn)碘酸鈉刺激濃度。采取不同濃度非諾貝特預(yù)處理細(xì)胞2小時(shí)，使用確定濃度的碘酸鈉處理細(xì)胞24小時(shí)后收集細(xì)胞，檢測凋亡相關(guān)指標(biāo)的變化。
　?。?）動物實(shí)驗(yàn)：雄性C57BL/6小鼠尾靜脈注射碘酸鈉溶液（50mg/kg）誘導(dǎo)視網(wǎng)膜

2、變性。對小鼠飼予含0.1％非諾貝特飼料預(yù)處理3天，經(jīng)碘酸鈉尾靜脈注射3天后處死小鼠，取眼球組織檢測視網(wǎng)膜細(xì)胞變性凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)，Müller細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化及炎癥細(xì)胞變化。
　　結(jié)果：
　?。?）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：在ARPE-19細(xì)胞中，非諾貝特預(yù)處理組與單純碘酸鈉處理組相比，TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)具有顯著性差異（P＜0.01），蛋白印跡與免疫熒光結(jié)果顯示，caspase3的表達(dá)顯著降低，MTT結(jié)果顯示非諾貝特顯著提高細(xì)胞活性。

3、r>　?。?）動物實(shí)驗(yàn)：碘酸鈉（50mg/kg）靜脈注射后，TUNEL染色發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡明顯增加，呈時(shí)間依賴性，第三天達(dá)到細(xì)胞凋亡高峰。Muller細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化與細(xì)胞凋亡結(jié)果相一致。非諾貝特干預(yù)組與單純碘酸鈉注射組比較，TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)具有顯著性差異（P＜0.01）。免疫熒光顯示，非諾貝特處理組與碘酸鈉注射組比較，活化的半胱天冬酶蛋白 caspase3表達(dá)量顯著降低，下調(diào)膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP表達(dá)量，炎癥反應(yīng)相關(guān)蛋白CD1