肺炎衣原體抗原的檢測和多克隆抗體的制備及應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分:建立和應用直接免疫熒光檢測人外周血單個核細胞中Cpn特異性抗原的方法.從人全血中分離出PBMC,與熒光素標記的Cpn單克隆抗體(FITC-TT-401)在一定條件下反應,在熒光顯微鏡下觀察是否有特征性蘋果綠亮點,以此來判斷個體是否感染Cpn,PBMC中是否有Cpn活菌存在.該方法簡便、靈敏、可靠、節(jié)約試劑.并將該方法應用于140例有頸動脈內膜增厚或粥樣斑塊的患者組和50例健康對照組.第二部分:Cpn多克隆抗體的制備及應用.用C

2、pn菌株TW-183(2×10<'8>ifu)10μl與300μl福氏完全佐劑混勻加熱后皮下多點注射新西蘭白兔(New Zealand White,NZW).在第14,28和42天時用10μl菌株與300μl福氏不完全佐劑混勻加熱皮下多點注射,通過微量免疫熒光法檢測血清中抗Cpn抗體效價,效價達到預期(≥1:32)后,頸動脈插管放血50ml,分離血清20ml,用硫酸銨鹽析法、DEAE-SepHadex A-50層析法逐步純化抗Cpn(i

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