胎豬皮膚前體組織異種移植的實驗研究.pdf

1、皮膚是身體最大的器官，它兼負著機械防護、免疫調(diào)節(jié)、物質(zhì)代謝及體溫調(diào)節(jié)等功能。局部皮膚的嚴(yán)重損傷可通過自體全厚皮、游離皮瓣及帶蒂皮瓣移植重建其完整的結(jié)構(gòu)與功能；但臨床大面積燒、創(chuàng)傷患者由于自體皮源嚴(yán)重不足，大張異體皮加蓋自體微粒皮雖然能夠較快地封閉創(chuàng)面，挽救患者生命，但是往往遺留大量瘢痕，愈合后的皮膚組織機械強度和彈性遠不及正常皮膚，嚴(yán)重影響患者的愈后生活質(zhì)量。近年有研究發(fā)現(xiàn)特定胎齡的豬胚胎前體組織/器官(肝、腎、胰、脾等)異種移植后既能

2、夠生長發(fā)育成為相應(yīng)的成熟組織(或器官)又不形成畸胎瘤，且能發(fā)揮一定的生理功能。胎豬皮膚前體組織是否也具有這種特性呢？ 為解決大面積燒、創(chuàng)傷后創(chuàng)面覆蓋材料來源及創(chuàng)面愈合質(zhì)量等問題，本課題主要圍繞胎豬皮膚前體組織移植裸鼠后的生長發(fā)育問題，應(yīng)用簡便有效的胎豬皮膚前體組織異種移植模型，觀察了五個不同胎齡的胎豬皮膚前體組織移植裸鼠后的創(chuàng)面愈合特點及新生組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，評價了不同胎齡的胎豬皮膚前體組織的移植后生長潛能及成瘤性，探討胚胎皮膚前

3、體組織移植后的生長發(fā)育及其可能的機理。全文主要結(jié)果及結(jié)論如下： 1、本課題采用精確胎齡為56天的胎豬皮膚前體組織對3種不同的移植模型進行了對比，觀測移植后的生長特性。研究結(jié)果表明，裸鼠背部全層缺損創(chuàng)面加蓋異種皮移植胎豬皮膚前體組織微粒的方式是簡便有效的移植模型。 ①背部創(chuàng)面移植模型：裸鼠背部正中開創(chuàng)至肌膜上，創(chuàng)面植入胎豬皮膚前體組織微粒懸液，用人尸體皮覆蓋、縫合；②背部皮下移植模型：裸鼠背部正中橫向切口至肌筋膜上，植入小

4、塊郵票皮，縫合切口；③耳廓皮下移植模型：裸鼠雙耳廓皮下穿刺行胎豬皮膚前體組織微粒移植；背部創(chuàng)面模型及耳廓皮下模型新生組織塊大小采用雙樣本t檢驗。3種模型中移植的胎豬皮膚前體組織均能繼續(xù)生長發(fā)育成為具有表皮及真皮結(jié)構(gòu)的雙層皮膚組織，其中背部創(chuàng)面移植模型及背部皮下移植模型觀察到了汗腺，皮脂腺及毛囊等附件，耳廓皮下移植模型未見汗腺；背部創(chuàng)面移植模型的生長潛能遠高于耳廓皮下移植模型的生長潛能。 2、系統(tǒng)篩選了用于異種移植的胎豬皮膚前體組

5、織的最佳“妊娠時間窗”(gestationalwindow，以下簡稱時間窗)。選取了5個精確胎齡(E35、E42、E56、E70、E91)的胎豬皮膚前體組織，采用背部創(chuàng)面移植模型，觀察移植后創(chuàng)面的愈合情況，于移植后6周及12周取材檢測新生皮膚組織的結(jié)構(gòu)形態(tài)，評價成瘤性。直接免疫熒光及黑色素染色鑒定新生組織的種屬來源。移植后12周的新生組織塊大小采用單因素方差分析，比較其移植后的生長潛能。研究結(jié)果認(rèn)為胎豬皮膚前體組織異種移植后能夠繼續(xù)生長

6、發(fā)育成為結(jié)構(gòu)“完整”的成熟皮膚，且其最佳的取材時間窗在胎齡56天左右。 ①各胎齡的胎豬皮膚前體組織移植均能生長發(fā)育為具有表皮、真皮及毛發(fā)、皮脂腺及汗腺等附件的“完整”成熟皮膚組織；②E42的胎豬皮膚前體組織具有最大的生長能力(新生組織平均大小為47.1 mm2，LxW)，E56為31.1mm2，E35為18.4 mm2，E70為20.1 mm2，E91為6.5 mm2；③抗鼠的H-2Dd(FITC)免疫熒光及Fortana法黑色