強力霉素對兔創(chuàng)傷性骨關(guān)節(jié)炎模型中TGF-β1表達影響的實驗研究.pdf

1、目的：觀察強力霉素局部給藥對骨關(guān)節(jié)炎軟骨形態(tài)以及轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)表達的影響，研究其作用機制。為強力霉素臨床預(yù)防與治療創(chuàng)傷性骨關(guān)節(jié)炎提供實驗依據(jù)。 方法：(1) 動物分組：成年新西蘭大白兔32只，隨機分為兩組：①正常對照組，本組8只；②建模組，本組共24只，行右膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶切斷術(shù)(Anterior cruciate ligament transecti

2、on，ACLT)，術(shù)后四周將這24只隨機分為三組，每組8只：a模型對照組：右膝關(guān)節(jié)每日注射0.3 ml雙蒸水b強力霉素小劑量組：右膝關(guān)節(jié)每日注射0.67％強力霉素溶液0.3 ml(總量0.2 mg)c強力霉素大劑量組：右膝關(guān)節(jié)每日注射1.33％強力霉素溶液0.3 ml(總量0.4 mg)。 (2) 模型制作：除了正常對照組之外其他動物都用行右膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶切斷術(shù)(ACLT)，術(shù)后不固定患膝關(guān)節(jié)。分籠飼養(yǎng)，每籠一只。予以青霉素4

3、0萬單位肌注預(yù)防感染，一天一次，注射三天。術(shù)后第4天，驅(qū)趕實驗動物以強制膝關(guān)節(jié)活動，每天60分鐘，持續(xù)30天。術(shù)后4周，右膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎模型建立完成 (3) 動物處死后進行相關(guān)檢測，于解剖顯微鏡下行股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)面軟骨退變大體評分，取標(biāo)本作病理切片，軟骨Mankin's評分，用免疫組織化學(xué)方法檢測TGF-β1在股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)面軟骨中的表達情況。 (4) 所有統(tǒng)計分析均用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包完成。 結(jié)果：(1

4、) 軟骨的大體改變：正常對照組軟骨光滑透明，模型對照組軟骨面粗糙，見大量裂隙，局部纖維覆蓋，邊緣骨贅多。給予0.2 mg強力霉素后，軟骨面粗糙稍好轉(zhuǎn)，裂隙數(shù)量減少，邊緣骨贅小而少。給予0.4 mg強力霉素后，上述改變更加顯著。 (2)軟骨光鏡下的病理改變：模型對照組與正常對照組相比，Mankin's評分顯著增高，光鏡下軟骨細胞排列紊亂，甲苯胺藍染色減退(P<0.01)；強力霉素小劑量組與模型對照組相比，Mankin's評分顯著降

5、低(P<0.01)，強力霉素大劑量組降低更明顯。 (3) 免疫組化染色TGF-β1的表達：正常對照組表層軟骨細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)極少量的TGF-β1生成，在模型對照組中，軟骨細胞內(nèi)內(nèi)源性TGF-β1開始表達，強力霉素干擾下陽性細胞明顯增多(P<0.01)，大劑量組表達的TGF-β1量明顯高于小劑量組(P<0.01)。 結(jié)論：1 通過行兔膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶切斷術(shù)(ACLT)建立OA動物模型是可行的。 2.強力霉素關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥，