PLCE1和C20orf54基因多態(tài)與慢性食管炎易感性.pdf

1、1．目的:
　　 食管癌是世界上最常見的六大惡性腫瘤之一，在中國癌癥相關(guān)死亡原因中排第四位。食管癌變被認(rèn)為是一個多階段、進(jìn)行性的發(fā)展過程，在這個過程中，環(huán)境因素和遺傳因素都起著很重要的作用。環(huán)境中各種致癌因素的作用，可使食管上皮細(xì)胞DNA的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，在這個變化過程的不同階段，可能有多種基因發(fā)生變化，并作用于不同階段，可能發(fā)生不同的生物學(xué)改變，二者相互之間或多或少存在著不同的影響，而慢性食管炎為食管粘膜上皮癌變提供了一種

2、微環(huán)境。
　　 我們前期利用全基因組關(guān)聯(lián)分析方法(GWAS)發(fā)現(xiàn)了兩個重要的食管癌易感基因(PLCE1和C20orf54)，其中，PLCE1對調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞的增生、分化、凋亡和再生具有重要作用；C20orf54是核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)基因，在腸道吸收核黃素中起著重要的作用。本研究的目的旨在通過對高低發(fā)區(qū)慢性食管炎流行病學(xué)特征的分析以及從分子水平利用GWAS方法分析PLCE1和C20orf54單核苷酸基因多態(tài)性(SNP)與慢性食管炎的風(fēng)險性，探

3、討慢性食管炎的發(fā)病特點(diǎn)及其與食管癌的關(guān)系，深入解析慢性食管炎、食管癌的病變過程及其發(fā)病機(jī)制，為建立食管癌高危人群篩查預(yù)警、早診早治及個體化預(yù)防等策略提供一定的遺傳學(xué)依據(jù)和分子靶標(biāo)。
　　 2．研究對象與方法:
　　 2.1研究對象
　　 所有的調(diào)查對象均來自2008年底～2010年底河南省安陽市腫瘤醫(yī)院、河北省磁縣人民醫(yī)院及山西省長治市和平醫(yī)院等食管癌高發(fā)區(qū)和商丘市人民醫(yī)院、濮陽市人民醫(yī)院及信陽市人民醫(yī)院等食管癌

4、低發(fā)區(qū)門診胃鏡就診患者。
　　 2.2流行病學(xué)調(diào)查及基因型測定
　　 2.2.1所有調(diào)查對象(32833例)主要采用門診問卷調(diào)查、部分入戶調(diào)查及隨訪方法采集姓名、性別、年齡、籍貫等一般資料，并且全部經(jīng)過電子胃鏡檢查并明確診斷。
　　 2.2.2725例慢性食管炎患者及2187例正常對照的單核苷酸多態(tài)性rs2274223和rs13042395的基因型(通過國際公認(rèn)的Illumina Human610-Quad Be

5、adChips SNP芯片獲得)用于分析。
　　 2.3資料的收集與整理
　　 所有調(diào)查結(jié)果均采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入及軟件處理。并且通過查閱病人就診檔案及部分隨訪，進(jìn)一步確認(rèn)胃鏡診斷及病理學(xué)診斷，并收集相關(guān)資料(包括臨床背景資料，聯(lián)系方式等)。
　　 2.4血樣采集和處理
　　 在就診者知情同意的前提下，對其采集空腹外周靜脈血(每人每次5ml)，現(xiàn)場抗凝處理，再轉(zhuǎn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入實(shí)驗(yàn)或-40℃/-80℃冰

6、箱備用。
　　 2.5統(tǒng)計方法分析
　　 進(jìn)行病例組和對照組人群的均衡性檢驗(yàn)，以確定病例組與對照組之間有無選擇性差異。所有數(shù)據(jù)的分析均采用SPSS17.0軟件，采用卡方檢驗(yàn)分析每一變量，檢驗(yàn)顯著性水準(zhǔn)取α=0.05，P＜0.05有顯著性意義；應(yīng)用多因素非條件Logistic回歸分析(選入變量和剔除變量標(biāo)準(zhǔn)分別為0.05和0.10)，從分子水平探討不同因素對慢性食管炎發(fā)病的影響。
　　 3．結(jié)果:
　　 3

7、.1慢性食管炎檢出率
　　 慢性食管炎的檢出率為9.78％(3203/32833)。高發(fā)區(qū)慢性食管炎的檢出率10.98％(1065/9702)略高于低發(fā)區(qū)9.24％(2138/23131)(P=1.35E-6，x2=23.35，OR=1.21，95％CI為1.12-1.31)。高發(fā)區(qū)重度慢性食管炎的檢出率7.68％(745/9702)明顯高于低發(fā)區(qū)的檢出率1.25％(289/23131)(P=1.83E-203，x2=926.3

8、5,OR=6.57,95％CI為5.73-7.55)。
　　 3.2慢性食管炎性別和年齡分布
　　 3.2.1慢性食管炎發(fā)病性別比例分別為男性64.06％(2052/3203)、女性35.94％(1151/3203)；平均年齡為52±12歲，年齡范圍16～84歲，發(fā)病年齡以40-60歲為主(57.70％)。
　　 3.2.2高發(fā)區(qū)(男：63.10％，女：36.90％)與低發(fā)區(qū)(男：64.55％，女：35.45％)

9、慢性食管炎病人性別分布都提示以男性為主，高/低發(fā)區(qū)性別之間未見顯著性差異(P==4.21E-1,x2=0.65,OR=0.94,95％CI為0.81-1.10)。
　　 3.2.3高發(fā)區(qū)和低發(fā)區(qū)慢性食管炎平均年齡分別為54±11歲和51±12歲，年齡范圍分別為18～84歲和16～83歲，兩者平均年齡之間有顯著性差異(P=3.59E-4)；高發(fā)區(qū)與低發(fā)區(qū)慢性食管炎都集中在40-60歲之間，分別為60.37％、56.36％，高/低發(fā)

10、區(qū)慢性食管炎年齡分部之間有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P=1.11E-8)。
　　 3.3基因多態(tài)和慢性食管炎
　　 3.3.1病例組與對照組rs2274223與rs13042395位點(diǎn)基因型和等位基因總體分布都具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=5.30E-3，x2=10.48及P=1.72E-3，x2=9.83，OR=1.25，95％CI為1.09-1.43；P==4.62E-2,x2=6.15及P=4.91E-2,x2=3.87,OR=1.1

11、4,95％CI為1.00-1.31)。
　　 3.3.2高發(fā)區(qū)與低發(fā)區(qū)慢性食管炎患者之間rs2274223與rs13042395位點(diǎn)基因型分布均無統(tǒng)計學(xué)意義(P未調(diào)整=9.47E-1，P調(diào)整=9.26E-1，x2=0.11；P未調(diào)整=1.68E-1，P調(diào)整=6.67E-2，x2=3.57)。
　　 3.3.3 Logistic回歸分析結(jié)果提示，病例組與對照組rs2274223位點(diǎn)基因型分布具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=1.09E-

12、2，x2=6.47，OR=1.52，95％CI為1.10-2.14)；而rs13042395位點(diǎn)基因型分布沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P=5.66E-1，x2=0.37，OR=1.11，95％CI為0.80-1.53)。
　　 3.4慢性食管炎發(fā)病危險因素分析
　　 Logistic回歸分析綜合評價發(fā)現(xiàn)：男性、40～60歲年齡、高發(fā)區(qū)是慢性食管炎發(fā)生的危險因素；PLCE1基因突變增加了慢性食管炎的患病風(fēng)險。
　　 4．結(jié)論: