毛細(xì)管電泳免疫分析法檢測(cè)諾氟沙星獸藥殘留.pdf

1、農(nóng)獸藥殘留是影響食品安全的主要因素之一，建立快速有效的檢測(cè)分析方法對(duì)食品品質(zhì)監(jiān)管具有十分重要的意義。諾氟沙星是一類人畜共用的合成抗生素，屬于第三代氟喹諾酮類藥物，臨床上廣泛用于治療消化系統(tǒng)紊亂和泌尿生殖感染等癥狀。如果長(zhǎng)期食用若氟沙星殘留過(guò)量的食品，通過(guò)食物鏈的蓄積作用，不僅會(huì)紊亂人體內(nèi)分泌系統(tǒng)，甚至還會(huì)造成體內(nèi)細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)，影響藥物的治療效果。毛細(xì)管電泳免疫分析技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的一種新型分析技術(shù)，它將電泳法的高分離效率和免疫法的高

2、靈敏度結(jié)合起來(lái)。由于具有高通量、樣品處理簡(jiǎn)單、耗樣量少等突出優(yōu)點(diǎn)，此法廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工等分析應(yīng)用領(lǐng)域。
　　本研究將毛細(xì)管電泳免疫法應(yīng)用于諾氟沙星檢測(cè)，建立了諾氟沙星毛細(xì)管電泳免疫分析聯(lián)用激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器的檢測(cè)方法。本方法基于熒光標(biāo)記諾氟沙星和諾氟沙星標(biāo)準(zhǔn)品競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合少量氟喹諾酮類多克隆抗體，通過(guò)檢測(cè)器檢測(cè)，產(chǎn)生游離的諾氟沙星和抗原抗體免疫復(fù)合物兩個(gè)峰，峰面積會(huì)隨著諾氟沙星標(biāo)準(zhǔn)品的濃度變化而相應(yīng)改變，因而能對(duì)諾氟沙星定性

3、定量分析。實(shí)驗(yàn)中合成出熒光標(biāo)記物，同時(shí)優(yōu)化了影響毛細(xì)管電泳分離效果的各項(xiàng)因素，如免疫反應(yīng)孵育時(shí)間、電泳緩沖液的濃度與pH值、電泳分離電壓與進(jìn)樣量等。
　　結(jié)果表明，在25 kV電壓下，抗原抗體孵育5 min后0.5 psi壓力下進(jìn)樣5s，電泳緩沖液組成為pH8.030 mM Na2B4O7-10 mM NaH2PO4，5 min內(nèi)即可完成分離，各峰峰形好，分離度較高。新建立的分析方法在0.08～50 ng/mL范圍內(nèi)線性良好，最低