維生素D受體基因多態(tài)性和乙型肝炎病毒與胰腺癌的相關(guān)研究.pdf

1、研究背景：
　　隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，部分惡性腫瘤的治療和預(yù)后得到了極大改善，但是胰腺癌的治療和預(yù)后仍然處于另一種相對(duì)不同的情況。根據(jù)最新統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，世界范圍內(nèi)胰腺癌死亡率在總癌癥死亡率中占第8位，發(fā)達(dá)國(guó)家中占總癌癥死亡率的第4位，每年約有266000人死于胰腺癌，并且大部分病人在確診后的一年內(nèi)死亡。胰腺位于腹膜后間隙造成胰腺癌早期癥狀隱匿，直到患者出現(xiàn)明顯癥狀而確診時(shí)疾病多已處于進(jìn)展期。胰腺癌的預(yù)后很大程度上與腫瘤分期有關(guān)，早期病人

2、術(shù)后5年生存率已經(jīng)達(dá)到20％左右，但是總體的5年生存率仍然不足5％。因此針對(duì)胰腺癌危險(xiǎn)因素的一級(jí)預(yù)防在整個(gè)疾病的防治中尤為重要。
　　目前認(rèn)為導(dǎo)致個(gè)體罹患胰腺癌的因素大體分為兩類:一種是基因因素。關(guān)于基因多態(tài)性與胰腺癌的關(guān)系，人們做了相當(dāng)深入的研究，也發(fā)現(xiàn)了某些基因多態(tài)性與胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)存在相關(guān)性。既往研究顯示維生素D(Vitamin D,VD)在體外實(shí)驗(yàn)中可以明顯抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖以及口服補(bǔ)充VD的劑量或接受日光照射時(shí)間長(zhǎng)短

3、與胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。但是關(guān)于維生素D受體(Vitamin D receptor,VDR)基因多態(tài)性與胰腺癌的關(guān)系的研究仍非常有限。
　　另一種是環(huán)境及后天生理病理因素，如吸煙、飲酒、肥胖、糖尿病以及慢性胰腺炎等。近5年來(lái)關(guān)于乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）與胰腺癌相關(guān)性的研究逐漸成為胰腺癌流行病學(xué)的一個(gè)熱點(diǎn)，但是不同研究的結(jié)果存在爭(zhēng)議。我們?cè)谶M(jìn)行病例對(duì)照研究的基礎(chǔ)上匯總既往文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果更新meta分析

4、結(jié)果以進(jìn)一步探討兩者之間的關(guān)系。
　　本課題以濟(jì)南為中心的山東地區(qū)胰腺癌病人和健康人群為研究對(duì)象，采用適宜的試驗(yàn)方法，對(duì)VDR基因rs2228570、rs1544410位點(diǎn)多態(tài)性和HBV與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性進(jìn)行了研究，同時(shí)分別探討VDR基因多態(tài)性和HBV與胰腺癌發(fā)生部位、疾病分期和病理分化程度的相關(guān)性。
　　第一部分維生素D受體基因rs2228570、rs1544410多態(tài)性與胰腺癌的相關(guān)研究
　　VDR作為一種親

5、核蛋白受體，廣泛分布于體內(nèi)各組織細(xì)胞中。早期研究發(fā)現(xiàn)VDR在體內(nèi)的生物學(xué)作用主要是經(jīng)典的鈣磷平衡調(diào)節(jié)作用，隨著近年來(lái)研究的不斷深入，相關(guān)結(jié)果顯示VDR還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、抑制細(xì)胞增殖及促進(jìn)細(xì)胞分化和凋亡的作用。基于以上研究，VDR的表達(dá)以及VDR基因多態(tài)性與癌癥的研究成為近十年來(lái)的研究熱點(diǎn)之一。目前的研究結(jié)果顯示VDR表達(dá)與人類癌細(xì)胞株的分化程度有關(guān)，對(duì)多種組織來(lái)源的癌細(xì)胞如人前列腺癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、皮膚癌細(xì)胞以及胰腺癌細(xì)胞具有調(diào)節(jié)生

6、長(zhǎng)、分化的作用，同時(shí)對(duì)抑制癌細(xì)胞等方面有調(diào)節(jié)作用。為了進(jìn)一步探討VDR基因多態(tài)性與胰腺癌的關(guān)系，我們?cè)O(shè)計(jì)了本部分研究來(lái)分析VDR基因多態(tài)性與胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)、腫瘤發(fā)生部位、疾病分期和癌細(xì)胞分化的關(guān)系。
　　目的與方法：
　　本研究中探討VDR基因rs2228570、rs1544410位點(diǎn)多態(tài)性與胰腺癌的關(guān)系。病例組為經(jīng)病理確診為胰腺腺癌的患者，對(duì)照組為健康查體人群，病例組共258人、對(duì)照組385人，病例組與對(duì)照組為1∶1.5

7、。我們應(yīng)用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)技術(shù)測(cè)定VDR基因rs2228570、rs1544410多態(tài)性等位基因以及基因型的頻數(shù)，并進(jìn)行單因素以及多因素邏輯回歸分析來(lái)研究不同等位基因、基因型與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系;此外，通過(guò)應(yīng)用列聯(lián)表分析來(lái)檢驗(yàn)基因型頻率與胰腺癌發(fā)生部位、疾病分

8、期和腫瘤分化程度的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.rs2228570單核苷酸位點(diǎn)與胰腺癌的關(guān)系
　　分別進(jìn)行單因素回歸分析和調(diào)整年齡、性別、吸煙史、飲酒史及糖尿病等混雜因素的多因素回歸分析，結(jié)果顯示:rs2228570基因多態(tài)性中TT基因型與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)（單因素:OR=3.024，95％CI=1.919～4.764，P=0.005;多因素:AOR=2.978，95％CI=1.844～4.81，P=0.0006）;

9、攜帶至少一個(gè)T等位基因的CT+TT基因型胰腺癌患病風(fēng)險(xiǎn)顯著增加（單因素:OR=2.424,95％CI=1.718～3.420,P=0.001;多因素:AOR=1.995,95％CI=1.311～3.035，P=0.0013）;T等位基因與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)(OR=1.869，95％CI=1.489～2.347，P=0.0001)。將胰腺癌按高分化、中分化、低分化分組，將胰腺癌分化程度與rs2228570多態(tài)性基因型頻率進(jìn)行列聯(lián)表分析

10、，結(jié)果顯示rs2228570基因多態(tài)性與胰腺癌分化程度顯著相關(guān)(P=0.006,x2=19.7208)。
　　2.rs1544410基因多態(tài)性與胰腺癌的關(guān)系
　　分別進(jìn)行單因素回歸分析和調(diào)整年齡、性別、吸煙史、飲酒史及糖尿病等混雜因素的多因素回歸分析，結(jié)果顯示:至少含有一個(gè)G等位基因的AG+GG基因型與胰腺癌患病風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)（單因素:OR=0.631，95％CI=0.449～0.887,P=0.008;多因素:AOR=0.6

11、48,95％CI=0.453～0.928,P=0.0179）;G等位基因與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)相關(guān)且有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=0.756，95％CI=0.603～0.947，P=0.015);單獨(dú)分析AG、GG基因型，未見(jiàn)明顯相關(guān)性。胰腺癌按TNM分期分為Ⅰ～Ⅳ期，將胰腺癌分期與rsi544410多態(tài)性基因型頻率進(jìn)行列聯(lián)表分析，結(jié)果顯示rs1544410基因多態(tài)性與胰腺癌分期相關(guān)性有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0148，x2=15.8179)。

12、
　　結(jié)論：
　　1.VDR基因多態(tài)性與個(gè)體罹患胰腺癌的風(fēng)險(xiǎn)之間存在顯著相關(guān)性。rs2228570位點(diǎn)突變純合子可以導(dǎo)致胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加，突變位點(diǎn)T以及攜帶至少一個(gè)T位點(diǎn)的基因型與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān);rs1544410突變基因位點(diǎn)G則可以降低胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　2.VDR基因多態(tài)性與胰腺癌的病理分化、疾病分期等臨床特征相關(guān)，從而可能影響疾病的預(yù)后。
　　第二部分乙型肝炎病毒與胰腺癌相關(guān)性的研究以及更新m

13、eta分析
　　慢性HBV感染是指感染HBV超過(guò)6個(gè)月，機(jī)體未徹底清除病毒的感染狀態(tài)。慢性HBV感染可以有明確的急性乙肝病史，也可能由于嬰幼兒時(shí)期感染HBV，由于當(dāng)時(shí)免疫系統(tǒng)尚未健全無(wú)法清除病毒而導(dǎo)致病毒潛伏于機(jī)體。近年來(lái)關(guān)于隱匿性HBV攜帶狀態(tài)的研究逐漸增多，臨床多以乙肝表面抗原陰性而乙肝核心抗體陽(yáng)性為特點(diǎn)。我國(guó)慢性HBV流行率約為7％，相比較全球感染情況，我國(guó)所面臨由HBV引起的公共衛(wèi)生威脅更加嚴(yán)重。近年來(lái)的研究表明HBV除定

14、植于肝組織中外，也可以定植于肝外組織比如腎臟、皮膚和胰腺組織中，既往已有數(shù)個(gè)隊(duì)列研究和病例對(duì)照研究探討HBV是否可能增加胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，但不同研究所得的結(jié)果存在爭(zhēng)議。本部分研究中包括胰腺癌病人與健康對(duì)照組的病例對(duì)照研究;結(jié)合病例對(duì)照研究結(jié)果并匯總以前發(fā)表的關(guān)于HBV與胰腺癌的研究結(jié)果進(jìn)行的meta分析更新，以進(jìn)一步探討HBV與胰腺癌的關(guān)系。
　　目的與方法：
　　病例對(duì)照研究中，病例組為收集的胰腺腺癌病人，對(duì)照組為健康查體

15、人群。病例組258人、對(duì)照組385人，病例組與對(duì)照組為1∶1.5。課題中收集了病例組和對(duì)照組人群的HBV攜帶狀態(tài)、年齡、性別、吸煙史、飲酒史以及糖尿病等臨床特征，進(jìn)行單因素以及多因素邏輯回歸分析來(lái)研究HBV與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系;并結(jié)合以上分析結(jié)果同時(shí)匯總2013年6月以前關(guān)于HBV與胰腺癌的研究結(jié)果更新meta分析以進(jìn)一步檢驗(yàn)兩者之間的相關(guān)性;此外，通過(guò)應(yīng)用列聯(lián)表分析來(lái)檢驗(yàn)HBV與胰腺癌發(fā)生部位、分期和分化程度的關(guān)系。
　　結(jié)果

16、：
　　1.HBV與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的分析
　　回歸分析結(jié)果顯示:乙肝表面抗原陽(yáng)性組胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增加（單因素:OR=2.380，95％CI=1.556～3.606，P=0.001;多因素:AOR=3.339，95％CI=2.081～5.358，P=0.001），根據(jù)HBV血清學(xué)標(biāo)志物分層研究結(jié)果顯不HBsAg+/antiHBcAb+組與胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)（單因素:OR=3.375，95％CI=1.915～5.950,

17、P=0.001;多因素:AOR=3.864,95％CI=2.057～7.255P=0.0032）;多因素分析顯示隱匿性HBV攜帶組（HBsAg-/antiHBcAb+組）胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯增加（AOR=1.163，95％CI=0.774～1.747，P=0.031）。meta分析結(jié)果顯示HBV可以顯著增加胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.392，95％CI=1.167～1.660，P=0.00)，亞組分析時(shí)隊(duì)列研究meta亞組分析結(jié)果處于臨界統(tǒng)

18、計(jì)學(xué)意義（OR=1.307，95％CI=0.966～1.715，P=0.053）。
　　2.HBV與胰腺癌部位、分期以及分化程度的關(guān)系
　　將胰腺癌按高分化、中分化、低分化分組，將胰腺癌分化程度與HBV相關(guān)各組進(jìn)行列聯(lián)表分析，結(jié)果顯示HBV與胰腺癌分化程度顯著相關(guān)(P=0.001，x2=37.4118)
　　結(jié)論：
　　1.研究結(jié)果提示慢性HBV感染可顯著增加胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，隱匿性HBV攜帶與胰腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明