維生素D受體基因多態(tài)性與多發(fā)性硬化相關(guān)性研究.pdf

1、10459200612044100204011公開(kāi)文學(xué)論大位州學(xué)鄭士碩(科學(xué)學(xué)位)維生素D受體基因多態(tài)性與多發(fā)性硬化相關(guān)性研究院系名稱:鄭州大學(xué)第一臨床學(xué)院學(xué)科門(mén)類:醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:神經(jīng)病學(xué)作者姓名:吳斌導(dǎo)師姓名、職稱:盧宏教授二零零九年五月鄭州大學(xué)21耳)9屆碩士研究生學(xué)位論文中文摘要在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科和第二附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院或出院后定期門(mén)診隨訪的臨床確診或?qū)嶒?yàn)室支持確診的MS患者均符合1983年P(guān)Ose:等制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)

2、所有研究對(duì)象均除外合并其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病及肝腎功能不全、惡性腫瘤、嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良、接受器官移植等疾病。對(duì)照組選擇120例無(wú)血緣關(guān)系的健康人，近期無(wú)感染、抽血前未經(jīng)手術(shù)、化療、免疫藥物及激素等治療年齡、性別與病例組匹配。全部受試對(duì)象均取得知情同意。2.取外周靜脈血:抽取研究對(duì)象清晨空腹肘靜脈血，并用乙二胺四乙酸(ethylenediamietraaeetieacid，ED毛勺抗凝，準(zhǔn)備抽提基因組DNA。3.采用聚合酶鏈反應(yīng)(卯一

3、帥erase比ainreaction，pcR)方法進(jìn)行VDR基因APal位點(diǎn)及Bsml位點(diǎn)目的基因片段擴(kuò)增，擴(kuò)增片段進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果參照Marker標(biāo)準(zhǔn)判斷。4.將PCR產(chǎn)物應(yīng)用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(restriCtionfragmentlengthpolymphism，RFLP)分析方法進(jìn)行分析，瓊脂糖凝膠電泳讀取檢測(cè)結(jié)果，進(jìn)行VDR基因APal位點(diǎn)及Bsml位點(diǎn)基因多態(tài)性分析和等位基因分型。5.應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS16.0對(duì)

4、數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)照組和病例組基因型的分布經(jīng)Hardy一Weinberg平衡檢驗(yàn)，有群體代表性。VDR基因APal及Bsml基因型、等位基因數(shù)用直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)，并計(jì)算各等位基因頻率，組間比較采用x’檢驗(yàn)，取a=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。基因型、等位基因與Ms的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度采用比值比(oddsratio，oR)和95%可信區(qū)間(confidenceintervals，Cl)表示。所有統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均應(yīng)用spss16.o完成。結(jié)果1.Ms組vDR基因