外源性成纖維細(xì)胞生長因子21對腺嘌呤致小鼠慢性腎功能不全的影響.pdf

1、目的:
　　在慢性腎功能不全患者中，成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21)作為一內(nèi)分泌因子，其在體內(nèi)的循環(huán)水平與腎功能相關(guān)，其血液水平與內(nèi)生肌酐清除率呈負(fù)相關(guān)。本實驗通過在腎功能不全的小鼠腹腔內(nèi)注射外源性FGF21，探討外源性FGF21對小鼠慢性腎功能不全的影響。
　　方法:
　　取27只雄性C57BL/6小鼠，10周齡，隨機分為3組:正常對照組（C組），腺嘌呤模型組（T組），F(xiàn)GF21干預(yù)組（F組）。T組及F組用腺嘌呤

2、造模:第1周250mg/kg隔日灌胃，第2周125mg/kg隔日灌胃。F組則在此基礎(chǔ)上每日給予外源性FGF21腹腔注射（劑量為400ug/kg），C組同時予以純水灌胃，生理鹽水腹腔注射。每天監(jiān)測體重變化及活動情況。4周后處死小鼠，收集血液，離心取血清檢測血尿素氮(BUN)、血肌酐(CRE)、血尿酸(BUA)等，用Elisa法測定血清FGF21的表達(dá)情況;用石蠟包埋腎組織，切片進(jìn)行H&E及Masson染色，觀察組織形態(tài)變化;用免疫組化法檢

3、測各組腎臟中FGF21蛋白、α-SMA及FN的表達(dá)情況。另外，提取腎臟皮質(zhì)組織的R NA，用QPCR方法檢測各組腎臟中TGF-β1及MCP-1 mRNA的表達(dá)情況;提取腎臟皮質(zhì)組織的蛋白，用Western blot方法檢測各組腎臟中TGF-β1及MCP-1蛋白的表達(dá)量情況。
　　結(jié)果:
　　T組小鼠在腺嘌呤灌胃后出現(xiàn)體重下降，偏安靜，毛發(fā)干枯，血肌酐(P＜0.01)、尿素氮(P＜0.05)及尿酸(P＜0.01)較正常對照組均

4、有所上升，提示出現(xiàn)了腎功能不全;同時H&E染色及Masson染色提示T組小鼠腎臟出現(xiàn)損傷，免疫組化提示腎臟α-SMA(P＜0.01)及FN(P＜0.01)表達(dá)量增加。
　　與T組相比較，給予FGF21腹腔注射的F組小鼠體重下降更為明顯，血肌酐(P＜0.05)、尿素氮(P＜0.01)及尿酸(P＜0.01)顯著性升高，H&E染色及Masson染色提示病變范圍加大，程度加深，免疫組化提示α-SMA(P＜0.01)、FN(P＜0.05)表

5、達(dá)量較T組明顯增加。另外，用QPCR法及Western blot法檢測腎臟TGF-β及MCP-1的mRNA及蛋白表達(dá)情況，實驗結(jié)果顯示，T組小鼠腎臟TGF-β1及MCP-1mRNA水平與正常對照組小鼠（C組）相比顯著性升高(P＜0.05)，F(xiàn)組小鼠上述因子的mRNA水平較T組明顯升高(P＜0.05)。此外，F(xiàn)組小鼠腎臟TGF-β1及MCP-1蛋白表達(dá)量較T組明顯升高(P＜0.05)
　　結(jié)論:
　　本研究顯示外源性FGF21