人臍血細胞靜脈移植對家兔急性心肌梗死心肌細胞凋亡的影響.pdf

1、研究背景: 心血管病是造成人類死亡的重要的疾病之一，其中心肌梗死和慢性心功能不全而導(dǎo)致死亡占心血管病死亡50％以上，目前所用的治療手段如溶栓、植入支架等介入手段只是恢復(fù)血流的再灌注，防止心梗面積的擴大，而不能逆轉(zhuǎn)已壞死的心肌。心臟移植手術(shù)由于供體來源，免疫排斥以及高額的手術(shù)費用而難以在臨床上廣泛使用。自20世紀90年代以來，干細胞技術(shù)的出現(xiàn)與發(fā)展，給予治療這類疾病以突破性的發(fā)展，隨后動物實驗證實，胚胎干細胞，骨骼肌干細胞，骨髓干

2、細胞等可以作為細胞移植的干細胞，但是存在供體來源受限，免疫排斥及倫理學糾紛問題等缺點，這使國內(nèi)外的許多學者陷入困境，就在這時一種新的干細胞-臍血干細胞應(yīng)運而生了，與其他干細胞相比臍血干細胞具有以下優(yōu)越性：臍血干細胞取材方便、含量豐富、排斥反應(yīng)性小，對產(chǎn)婦及新生嬰兒無危害等優(yōu)點而受到廣泛關(guān)注，理論上成為最適宜的干細胞來源。研究表明臍血干細胞移植可減低心梗范圍和改善心功能等，但臍血干細胞靜脈移植對心肌細胞凋亡的影響國內(nèi)尚未有報道。本研究旨在

3、觀察人臍血單個核細胞靜脈移植對家兔心肌梗死后心功能及心肌細胞凋亡的影響。 目的: 探討人臍血單個核細胞靜脈移植對家兔心肌梗死后心功能及心肌細胞凋亡的影響。 方法: 45只健康成年中國家兔（雌雄不限，體重2.5-3.0Kg）隨機分為3組：（1）移植組：15只，AMI模型建立后24小時經(jīng)耳緣靜脈注入含3×106 BrdU標記HUCBC細胞懸液500uL。（2）：對照組：15只，AMI模型建立后24小時經(jīng)耳緣靜

4、脈注入生理鹽水500uL。（3）假手術(shù)組：15只，左前降支穿線不結(jié)扎，術(shù)后24小時經(jīng)耳緣靜脈注入生理鹽水500uL。移植后1周、2周、4周各組隨機選取5只家兔行超聲檢測心功能；心肌組織切片HE染色觀測心肌病理變化；脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)末端標記法（TUNEL）檢測心肌細胞凋亡；免疫組化法檢測心肌BrdU陽性細胞及Bcl-2、Bax蛋白在心肌細胞中表達水平。 結(jié)果: （1）與假手術(shù)組比較，移植組與對照組超聲心功能指標短

5、軸縮短率（LVFS）、左室射血分數(shù)（LVEF）均顯著下降；與對照組比較，移植組移植后1周、2周、4周LVFS，LVEF均明顯改善（P<0.01）（2）移植組與對照組HE染色顯示梗死區(qū)明顯變薄，并有大量纖維結(jié)締組織形成。移植組免疫組化顯示梗死周邊區(qū)存在BrdU陽性細胞；部分染色陽性的細胞形態(tài)呈扁平狀，參與血管壁的組成。對照組梗死區(qū)及其周邊均未檢測到BrdU陽性的移植細胞。（3）免疫組化顯示對照組、移植組Bcl-2及Bax蛋白均有明顯陽性表

6、達；與對照組相比，移植組Bcl-2蛋白水平顯著升高（P<0.05），Bax蛋白水平顯著降低（P<0.05）而假手術(shù)組基本無Bcl-2，Bax陽性表達。（4）TUNEL法結(jié)果顯示移植術(shù)后4周移植組心肌細胞凋亡計數(shù)顯著低于對照組（P<0.05）。 結(jié)論: （1）經(jīng)靜脈移植人臍血細胞治療家兔急性心肌梗死能顯著改善心功能； （2）經(jīng)靜脈移植人臍血細胞治療家兔急性心肌梗死，臍血細胞能遷移至梗死周邊區(qū)，并存活； （3