聯(lián)合式學(xué)習(xí)誘導(dǎo)小鼠跨模式記憶的神經(jīng)基礎(chǔ).pdf

1、目的：建立小鼠關(guān)于胡須觸覺-嗅覺聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶和跨模式記憶的動(dòng)物模型，研究跨模式記憶的機(jī)理，檢驗(yàn)跨模式記憶的細(xì)胞基礎(chǔ)。研究策略是在聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶形成后，記錄小鼠桶狀皮層（Barrel Cortex）和梨狀皮層（Piriform Cortex）分別對嗅覺信號(hào)和胡須觸覺信號(hào)的反應(yīng)。
　　方法：1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)：分為小鼠胡須擺動(dòng)實(shí)驗(yàn)和T迷宮實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用出生后15天的昆明小白鼠，分為兩組即空白對照組（n=13只）和聯(lián)合訓(xùn)練組（n=16

2、只），空白對照組不做訓(xùn)練處理。訓(xùn)練組的訓(xùn)練模式是在以乙酸丁酯作為氣味源的嗅覺刺激下，給予胡須5Hz的機(jī)械振動(dòng)刺激。應(yīng)用Canon HFR28視頻拍攝儀對小鼠在乙酸丁酯氣味刺激的胡須擺動(dòng)情況進(jìn)行拍攝，采用會(huì)聲會(huì)影軟分析小鼠觸須擺動(dòng)的頻率變化。T迷宮實(shí)驗(yàn)是在給予小鼠胡須5Hz的機(jī)械振動(dòng)刺激下，小鼠對T迷宮兩臂的選擇性的變化。
　　2．場電位實(shí)驗(yàn)：選擇出生后15天的昆明小白鼠，小鼠入組條件是狀態(tài)良好，胡須和嗅覺功能正常，分為空白對照組（

3、n=13只）和聯(lián)合訓(xùn)練組（n=16只），空白對照組不做訓(xùn)練處理，訓(xùn)練組連續(xù)聯(lián)合訓(xùn)練10天。取實(shí)驗(yàn)小鼠，稱重，用20％烏拉坦對實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行腹腔注射麻醉，烏拉坦用量是0.1ml/10g，麻醉不宜過深，剪開小鼠頭部皮膚，暴露顱骨，迅速將小鼠固定于鼠腦立體定位儀上，運(yùn)用鼠腦立體定位儀對小鼠桶狀皮層（Barrel Cortex）和梨狀皮層（Piriform Cortex）進(jìn)行腦部定位，定位準(zhǔn)確后行開顱手術(shù)，手術(shù)應(yīng)迅速準(zhǔn)確，防止時(shí)間過長可能會(huì)使小鼠

4、麻醉蘇醒，此時(shí)應(yīng)追加少許麻醉藥或者局部滴加試驗(yàn)用利多卡因進(jìn)行局部麻醉。利用NARISHIGE電動(dòng)顯微操作器將電極插入桶狀皮層（Barrel Cortex），在給予小鼠胡須5Hz機(jī)械振動(dòng)刺激和氣味刺激的條件下，用Axoclamp-200B放大器采集場電位信號(hào)；同樣將電極插入梨狀皮層（Piriform Cortex），在給予小鼠胡須5Hz機(jī)械振動(dòng)刺激和氣味刺激的條件下記錄場電位信號(hào)。
　　結(jié)果：1.行為學(xué)結(jié)果：小鼠在接受胡須-嗅覺聯(lián)合

5、訓(xùn)練10天后能建立起以乙酸丁酯氣味刺激為條件刺激的聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶，表現(xiàn)在以乙酸丁酯作為嗅覺刺激條件下的胡須擺動(dòng)頻率的增加；在以機(jī)械振動(dòng)作為觸覺刺激條件下的T迷宮實(shí)驗(yàn)中，聯(lián)合訓(xùn)練組小鼠選擇避開乙酸丁酯氣味的只數(shù)較正常組多，且與正常組相比有顯著差異。
　　2.場電位實(shí)驗(yàn)結(jié)果：（1）在模型建立小鼠的桶狀皮層（Barrel Cortex）插入電極，給予乙酸丁酯的氣味刺激時(shí)，有場電位信號(hào)的出現(xiàn)；給予胡須5Hz的機(jī)械振動(dòng)刺激時(shí)，有場電位信號(hào)的

6、出現(xiàn)；（2）在模型建立小鼠的梨狀皮層（Piriform Cortex）插入電極，給予胡須5Hz的機(jī)械振動(dòng)刺激時(shí)，有場電位信號(hào)的出現(xiàn)；給予乙酸丁酯的氣味刺激時(shí)，有場電位信號(hào)的出現(xiàn)；（3）在正常組小鼠的桶狀皮層（Barrel Cortex）插入電極同時(shí)給予乙酸丁酯的氣味刺激時(shí)，無場電位信號(hào)的出現(xiàn)；給予胡須5Hz的機(jī)械振動(dòng)刺激時(shí)，有場電位信號(hào)的出現(xiàn)；（4）在正常組小鼠的梨狀皮層（Piriform Cortex）插入電極同時(shí)給予胡須5Hz的機(jī)械

7、振動(dòng)刺激時(shí)，無場電位信號(hào)的出現(xiàn)；給予乙酸丁酯的氣味刺激時(shí)，有場電位信號(hào)的出現(xiàn)；
　　結(jié)論：1.小鼠在接受胡須觸覺-嗅覺聯(lián)合訓(xùn)練一段時(shí)間后，能建立條件反射形成聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶。2.小鼠在受到胡須觸覺-嗅覺聯(lián)合式訓(xùn)練后，形成了聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶，觸覺和嗅覺相應(yīng)代表區(qū)的桶狀皮層（Barrel Cortex）和梨狀皮層（Piriform Cortex）之間有交叉感覺反應(yīng)的出現(xiàn)，兩皮層之間可能形成了某種聯(lián)系。3.聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶可能更優(yōu)于單純的單獨(dú)