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1、大腸癌(Colorectal Cancer,CRC)是最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一,發(fā)病率在全球人類(lèi)高發(fā)腫瘤中位列第三,它包括結(jié)腸癌和直腸癌兩部分,具有高死亡率,高復(fù)發(fā)率和高轉(zhuǎn)移率的特點(diǎn),且預(yù)后較差,所以對(duì)其的及時(shí)診治就顯得尤為重要。目前在臨床上唯一被用來(lái)檢測(cè)大腸癌表達(dá)產(chǎn)物的是血清CEA檢測(cè)技術(shù),然而一方面,大量的測(cè)試需要大量的血清CEA,這直接導(dǎo)致了測(cè)試價(jià)格的昂貴;另一方面,它存在假陽(yáng)性率和假陰性率高的問(wèn)題,特異性和敏感度均較低,故其在
2、臨床上的診斷價(jià)值有限。
近年來(lái),隨著蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展,研究者以期通過(guò)此新技術(shù)找到更好的篩選和鑒定腫瘤的生物標(biāo)志物,從而在腫瘤治療中取得新突破。
本研究分別從兩種芯片出發(fā),即金芯片(Gold Chip)和正相親水(Normal Phase 20,NP20)芯片,采用分子流行病學(xué)(Molecular Epidemiology)的研究方法和理論,以中國(guó)人群為研究對(duì)象,創(chuàng)新性地結(jié)合磁珠與表面增強(qiáng)激光解析電離飛行
3、時(shí)間質(zhì)譜(SELDI-TOF-MS)技術(shù)檢測(cè)大腸癌患者血清蛋白質(zhì)組,包括篩選大腸癌血清候選標(biāo)志物:不同臨床分期大腸癌血清的差異表達(dá)蛋白篩選等;同時(shí)還探索性的研究了結(jié)腸癌和直腸癌之間的差異蛋白峰,試圖以蛋白質(zhì)組學(xué)的角度區(qū)分兩者.最后,應(yīng)用了決策樹(shù)建模分析法建立了兩種芯片的聯(lián)合診斷模型,初步探討了所建立的診斷模型在大腸癌早期診斷中的臨床意義,以期優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果.
本文還比較分析了兩芯片的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并評(píng)價(jià)了本實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用的磁珠結(jié)合SELD
4、I-TOF-MS技術(shù),試圖為篩選腫瘤標(biāo)志物提供一個(gè)嶄新的研究思路和技術(shù)平臺(tái).結(jié)果表明,癌癥組與正常組樣品間的差異非常顯著,從NP20和AU兩種芯片的分析結(jié)果來(lái)看,分別找到了m/z為13732.4和13912.3兩種峰能較好的把兩組樣品區(qū)分開(kāi),而兩個(gè)峰的位置相隔很近,推測(cè)這兩種顯著差異峰對(duì)應(yīng)的化合物比較相似,說(shuō)明兩種芯片得到的結(jié)果較為吻合,它們有可能成為診斷大腸癌的新生物標(biāo)志物;結(jié)直腸癌早晚期的區(qū)別也很明顯;而相比之下,直腸癌與結(jié)腸癌的蛋
5、白表達(dá)區(qū)分不是很明顯。而兩種芯片建立的聯(lián)合診斷模型,其預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確率有所提高,優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)結(jié)果.另外,通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,磁珠結(jié)合SELDI蛋白芯片技術(shù)具有廉價(jià),快速,靈敏度高,操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),故此實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線(xiàn)還是具有探討價(jià)值的.
綜上所述,本研究摸索并最終確定的最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件可作為研究者們今后做相關(guān)實(shí)驗(yàn)的一個(gè)重要技術(shù)路線(xiàn)參考依據(jù),而本研究最終建立的聯(lián)合診斷模型和篩選出的候選生物標(biāo)志物也可為將來(lái)將它們投入到實(shí)際臨床檢測(cè)中提供重要的理論
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