雙氫青蒿素哌喹片含量測定研究與傷濕祛痛膏中烏頭堿的檢查研究.pdf

1、雙氫青蒿素哌喹片為青蒿素第二代抗瘧疾藥，是治療瘧疾，尤其是多重抗藥性惡性瘧疾的首選藥物。其兩個有效成分分別為：雙氫青蒿素(Dihydroartemisinin，DHA)和磷酸哌喹(Piperaquine phosphate，POP)。我國現(xiàn)行國家藥品質量標準中，DHA的含量測定方法為：用硅膠柱分離洗脫后，揮干溶劑，收集殘渣，經堿水解產生有紫外吸收的物質，紫外分光光度法測定。該操作步驟多，引入誤差的機會多。本課題旨在建立專屬性強、準確、簡

2、便的定量分析方法，采用HPLC-UV法直接測定雙氫青蒿素哌喹片中的DHA。我國現(xiàn)行國家藥品質量標準中，采用紫外分光光度法(Ultraviolet Specterphotometry，UV)測定雙氫青蒿素哌喹片中磷酸哌喹的含量。由于復方制劑中干擾因素多，不經分離直接采用紫外分光光度法測定磷酸哌喹的含量誤差較大。 本課題旨在建立專屬性強、準確、簡便的定量分析方法，采用HPLC-UV法測定雙氫青蒿素哌喹片中的PQP。 傷濕祛痛

3、膏是由川烏、草烏等藥材制成的復方橡皮膏劑，主要用于頭痛、風濕痛、神經痛等。因為川烏、草烏中均含有劇毒的烏頭堿類酯型生物堿，而傷濕祛痛膏的我國現(xiàn)行國家藥品質量標準中，并未對烏頭堿進行限量控制。所以，為完善傷濕祛痛膏的質量標準，更好地控制產品質量，本課題采用薄層色譜法(Thin Layer Chromatography，TLC)對傷濕祛痛膏中烏頭堿的限量檢查進行研究，該檢查方法簡便、結果準確。 方法： 雙氫青蒿素的含量測定采

4、用HPLC法，用外標法以α和β體峰面積之和對DHA進行定量分析。理論板數(shù)按α異構體峰或β異構體峰計算均不低于10000。 液相色譜條件(DHA)色譜柱：Phenomenex C18柱(250 mm×4.6mm，5μm)；乙腈-甲醇-0.02 mol·L<'-1>硫酸銨(50:10:40，稀硫酸調節(jié)至pH 4.8)；流速：1.0 mL·min<'-1>；檢測波長：210nm；柱溫：30℃；進樣量：10μL。 磷酸哌喹的含量

5、測定采用HPLC法，用外標法以峰面積對PQP進行定量計算。理論板數(shù)以磷酸哌喹峰計不低于2000。 液相色譜條件(PQP)色譜柱：Phenomenex C18(250 mm×4.6mm，5μm)；流動相：乙腈-0.022 mol·L<'-1>鹽酸(30:70，三乙胺調節(jié)至pH 2.3)；流速：1.0 mL.min<'-1>；檢測波長：225 nm；柱溫：30℃；進樣量：10μL。 烏頭堿的限量檢查采用TLC對照品比較法，實

6、現(xiàn)良好分離，重現(xiàn)性好。 薄層色譜條件展開劑：正己烷-乙酸乙酯-無水乙醇(6.4:3.6:1)；顯色劑：稀碘化鉍鉀試液。 結果： 雙氫青蒿素的含量測定方法精密度好，DHA的RSD為0.49％(n=5)；準確度高，回收率為98.6％；雙氫青蒿素在0.84～25.12μg的范圍內，峰面積與濃度間呈現(xiàn)良好的線性，線性方程為A=29987C+1006.6，γ=0.9999(n=7)；信噪比S/N=10時，雙氫青蒿素的最低定

7、量限為80 ng；供試品溶液在分析濃度下，8小時內基本穩(wěn)定。 磷酸哌喹的含量測定方法精密度好，PQP的RSD為0.57％(n=6)；準確度高，回收率為101.3％；磷酸哌喹在0.20～1.21μg的范圍內，峰面積與濃度間呈現(xiàn)良好的線性，線性方程為A=525092C+36071，γ=0.9998(n=5)；信噪比S/N=10時，磷酸哌喹的最低定量限為90 ng，供試品溶液在分析濃度下，8小時內基本穩(wěn)定。 烏頭堿的限量檢查烏