抗人胰腺癌細胞單克隆抗體的制備及初步放射免疫顯像研究.pdf

1、目的：制備抗人胰腺癌細胞單克隆抗體(McAb)，并對其特性進行鑒定及進行放免顯像的初步研究，為抗人胰腺癌細胞單克隆抗體在胰腺癌的早期診斷和治療的應用奠定基礎。 方法：以胰腺癌細胞系Para8988免疫Balb/c小鼠，取其脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞SP2/0進行融合，經(jīng)選擇培養(yǎng)，篩選及克隆化后，建立雜交瘤細胞系。運用ELISA方法篩選；用瓊脂糖雙擴散法鑒定IgG亞類；flowcytometry及免疫組化鑒定抗體組織特異性；以MTT法

2、研究抗體對胰腺癌細胞的殺傷作用；免疫沉淀法檢測該抗體所結合抗原的相對分子量；用90Tcm標記該抗體進行放免顯像的實驗研究。 結果：經(jīng)選擇培養(yǎng)，篩選及克隆化后，得到一株能穩(wěn)定分泌抗人胰腺癌細胞單克隆抗體的細胞株2F4A7(D1)。Ig類及亞類鑒定結果表明，2F4A7(D1)抗體類型為IgGl亞類。間接ELISA檢測腹水效價為l：16000；流式細胞儀檢測表明：該抗體與Para8988細胞呈陽性反應p90％)，與肝癌、腎癌、胃癌、肺

3、癌、乳腺癌呈陰性反應(<5％)；MTT法示抗體對胰腺癌細胞的殺傷率明顯高于對照組；單克隆抗體McAb2F4A7(D1)與人乳腺癌組織、肝癌組織、卵巢癌組織、胃癌組織、肺癌組織以及正常胰腺組織的免疫組織化學反應結果表明，2F4A7(D1)的特異性較好；單克隆抗體McAb2F4A?(D1)經(jīng)99Tcm標記后，用于荷胰腺癌裸鼠的放射免疫定位顯像。9只荷人胰腺癌裸鼠在注射人胰腺癌細胞后8周，注射部位腫瘤長至約2cm3。尾靜脈注入99Tcm標記的