HLA-F在肝細胞癌中的表達及預后意義.pdf

1、目的:
　　人類白細胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關，HLA-Ⅰ類分子表達下調可使腫瘤細胞逃避細胞毒性T細胞的免疫識別，而非經典HLA-Ⅰ類分子(HLA-E、G、F)作為免疫耐受分子，亦可幫助腫瘤細胞逃避機體免疫細胞（T淋巴細胞）的識別與殺傷。HLA-F是新近發(fā)現的第三種非經典HLA-Ⅰ類分子，其功能及臨床研究剛剛起步。本研究通過檢測肝癌患者組織中HLA-F的表達情況，分析

2、其與臨床病理因素及預后的相關性，探討HLA-F在肝癌發(fā)生、發(fā)展中的作用機制及其相關臨床意義，為肝癌的早期診斷和預后判斷尋找新的標記物。
　　方法:
　　1.標本收集
　　收集2005年9月至2011年1月在醫(yī)院接受手術治療的115例肝細胞癌患者，其中男性90例，女性患者25例，中位年齡為53歲（12歲至74歲，）患者術前均未接受放化療或其他任何藥物干預。采集115例肝癌癌灶組織作為實驗組，以及66例相應鄰近正常肝臟組織

3、為對照組。所有人體標本的研究均事先獲得相關倫理委員會的批準。所有標本的使用均由病人或其委托人簽署知情同意書。
　　2.肝癌組織蠟塊制備并切片
　　將上述肝癌或正常組織切成1.5×1.5×0.3cm大小，用石蠟包埋后切成4μm厚的切片，并平鋪在多聚賴氨酸包被的載玻片。
　　3.收集肝癌患者的臨床病理資料
　　包括:門靜脈癌栓、淋巴結轉移、漿膜累及情況，腫瘤大小、數目，TNM分期，性別，年齡，確診日期，死亡時間等。<

4、br>　　4.采用免疫組織化學方法檢測肝癌癌灶及正常組織中HLA-F表達情況。
　　5.統計分析
　　分析HLA-F表達與各臨床病理因素以及患者預后的相關性。HLA-F表達與臨床病理因素關系分析采用Pearson x2檢驗。術后生存率采用Kaplan-Meier法，生存曲線比較采用log-rank檢驗，運用Cox回歸進行單因素及多因素生存分析。所有統計分析均采用SPSS13.0統計軟件包進行，P＜0.05為結果有統計學意義。

5、
　　結果:
　　1.HLA-F染色產物呈棕色或棕褐色染，見于細胞膜或細胞質，胞核未見染色產物。
　　2.HLA-F在肝癌癌灶及鄰近正常組織中的表達
　　HLA-F在肝癌癌灶組織及正常肝臟組織中表達陽性率分別為:47.0％(54/115)，10.6％(7/66)，兩者差異有統計學意義（x2=24.799，P＜0.05），癌灶組織HLA-F表達量高于正常組織。
　　3.HLA-F表達與臨床病理因素的關系

6、>　　癌灶區(qū)HLA-F的表達量與門靜脈癌栓（x2=7.644，P=0.006）及患者性別(x2=6.759，P=0.009)具有相關性，而與患者年齡（x2=0.032，P=0.857）、腫瘤大?。▁2=0.493，P=0.483）、腫瘤數目（x2=2.523，P=0.112）、漿膜侵犯(x2=0.001，P=0.970)、TNM分期（x2=0.007，P=0.932）等無明顯相關。HLA-F表達更多見于門靜脈癌栓陽性的患者。
　　

7、4.HLA-F與肝癌患者預后的關系
　　1) Kaplan-Meier分析:
　　HLA-F陽性患者預后較陰性患者差（x2=5.148，P=0.023），HLA-F陽性患者術后平均生存時間為34.0個月（95％CI，27.5-40.5月），HLA-F表達陰性HCC患者術后平均生存時間為44.6個月（95％CI，38.3-50.9月）。肝癌患者術后生存時間尚與TNM分期、門靜脈癌栓有關，而與腫瘤數目、腫瘤大小、漿膜侵犯等無關。

8、TNMⅠ/Ⅱ患者術后平均生存時間為43.7個月（95％CI，38.6-48.9月），TNMⅢ/Ⅳ期患者術后平均生存時間為28.4個月（95％CI，21.0-35.9月），TNMⅠ/Ⅱ期患者生存時間長于TNMⅢ/Ⅳ期患者（x2=8.771，P=0.003）。門靜脈癌栓陽性患者術后平均生存時間為23.8個月（95％CI，13.8-33.8月），門靜脈癌栓陰性患者術后平均生存時間為42.0個月（95％CI，37.1-46.8月），門靜脈癌栓陰

9、性患者生存時間長于門靜脈癌栓陽性患者（x2=8.541，P=0.003）。
　　2) COX回歸分析:
　　經單因素和多因素分析顯示HLA-F表達(P=0.010)和TNM分期(P=0.002)均是影響肝癌患者術后生存的獨立危險因素，RR值分別為:2.468(1.238-4.921)，1.818(1.246-2.653)。而患者性別、年齡、腫瘤大小、漿膜侵犯、門靜脈癌栓等均不是HCC患者預后影響因素。
　　結論: