版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的: 分別從蛋白和基因水平,檢測DKK1在膠質瘤細胞株/系、腫瘤患者組織、血清和腦脊液中的表達情況;分析DKK1表達程度與膠質瘤級別的相關性。 方法: 細胞株/系:選用12株膠質母細胞瘤細胞株/系(U251、SF767、SF295、T98G、MGR1、MGR2、MGR3、SKMG1、SKMG4、UWR7、UW28、SKI-N2)、髓母細胞瘤細胞株D341和星形細胞瘤2級細胞系SHG44共14株膠質瘤細胞株/系,
2、人腦星形膠質細胞作為正常對照組。ELISA雙抗體夾心法檢測上述各細胞培養(yǎng)上清液和細胞裂解液中DKK1蛋白含量;半定量RT-PCR檢測上述各細胞中DKK1mRNA表達情況,t檢驗分析膠質瘤細胞組和正常對照組之間DKK1表達差異; 腫瘤組織:收集膠質瘤患者腫瘤組織,以腦外傷內減壓切除組織為對照組,制成石蠟包埋組織和新鮮冰凍組織。采用免疫組織化學方法檢測石蠟包埋組織中DKK1蛋白含量,CMH卡方檢驗比較DKK1在膠質瘤組與正常對照組之
3、間的表達差異,Kendall'tau-c相關性分析法檢驗DKK1表達與膠質瘤級別的相關性;半定量RT-PCR檢測上述組織標本中DKK1mRNA表達情況,t檢驗分析膠質瘤組和正常對照組之間DKK1表達差異; 腦脊液和血清:收集膠質瘤患者,神經系統良性腫瘤患者(垂體瘤,腦膜瘤,神經鞘瘤,聽神經瘤等)的腦脊液和血清,以腦外傷患者的腦脊液和血清為對照組。ELISA雙抗體夾心法檢測各組腦脊液和血清中DKK1蛋白表達情況,t檢驗分析各組間D
4、KK1表達差異。 結果: 1.ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清液和細胞裂解液結果: ①12株高級別膠質瘤細胞株/系均有不同程度DKK1蛋白表達,低級別膠質瘤細胞系SHG44、髓母細胞瘤細胞株D341均未見表達;對照組人腦星形膠質細胞和各細胞培養(yǎng)液中亦未見DKK1蛋白表達。高級別膠質瘤細胞組中與低級別膠質瘤細胞、正常對照組之間DKK1蛋白表達差異有統計學意義(P<0.05),低級別膠質瘤細胞與正常對照組均無DKK1蛋白表
5、達,差異無統計學意義(P>0.05); ②高級別膠質瘤細胞株/系組中,培養(yǎng)上清液中DKK1蛋白含量明顯高于細胞裂解液中DKK1蛋白含量,差異有統計學意義(P<0.05)。 2.ELISA檢測腦脊液和血清中DKK1蛋白表達結果: ①腦脊液中,膠質瘤組DKK1含量顯著高于神經系統良性腫瘤組及正常對照組;神經系統良性腫瘤組與正常對照組間無明顯差異; ②血清中,膠質瘤組,神經系統良性腫瘤組及正常對照組之間DKK1
6、含量均未見顯著性差異。 3.免疫組織化學檢測石蠟包埋腫瘤組織中DKK1蛋白表達結果①DKK1在膠質瘤組織中的陽性表達率為(91.5%,43/47),在正常腦組織中陽性表達率為(18.1%,2/11);膠質瘤組織中DKK1陽性表達水平高于正常腦組織; ②DKK1在膠質瘤組織中的表達與腫瘤病理分級呈正相關。 4.RT-PCR檢測DKK1mRNA表達結果: ①12株膠質母細胞瘤細胞株/系的DKK1基因擴增產物均
7、有一條230bp左右亮度不一的特異性條帶;低級別膠質瘤細胞系SHG44、髓母細胞瘤細胞株D341和正常對照組人腦星形膠質細胞均未見特異性條帶; ②膠質瘤組織中灰度值高于正常組織,差異有統計學意義(p<0.05)。 結論: 1.DKK1在膠質瘤中的表達顯著高于在正常人腦中的表達: 2.在膠質瘤中,隨著腫瘤級別的增高DKK1的表達程度亦增高; 3.膠質瘤腦脊液中DKK1含量顯著高于神經系統良性腫瘤組及
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 膠質瘤中E2F-1、Rb的表達及其與腫瘤惡性程度的相關性研究.pdf
- 膠質瘤中E2F1、MDM2的表達及其與腫瘤惡性程度的相關性研究.pdf
- PDCD4在人腦膠質瘤中的表達與惡性程度的相關研究.pdf
- VEGF在腦膠質瘤中的表達及其與預后的相關性研究.pdf
- 人腦膠質瘤誘導分化相關基因在不同惡性程度膠質瘤臨床標本中的表達情況分析.pdf
- HMGA1、TROP2在惡性膠質瘤中的表達及相關性研究.pdf
- CD147在腦膠質瘤中的表達及其與腫瘤增殖、侵襲的相關性研究.pdf
- DKK1、SFRP4及β-catenin在宮頸鱗癌中的表達及其相關性研究.pdf
- 腦膠質瘤組織中惡性程度相關蛋白質表達譜的分析與鑒定.pdf
- HIF-1α在人腦膠質瘤中的表達及其與微血管密度相關性研究.pdf
- VEGF、HIF-1α在腦膠質瘤中的表達及相關性研究.pdf
- 膠質瘤中Rac1蛋白表達和其在惡性膠質瘤侵襲中作用的研究.pdf
- ADA-ADK在膠質瘤體、瘤周過表達與膠質瘤相關性癲癇的關系.pdf
- EGFRRVⅢ在惡性多形性膠質瘤中的表達及其功能.pdf
- 惡性膠質瘤相關基因表達變化的研究.pdf
- 膠質瘤中PIN1-NANOG相關通路表達的相關性研究.pdf
- 膠質瘤中PTEN、FAK的表達及相關性的研究.pdf
- NEDD4-1、PTEN在膠質瘤中的表達及相關性的研究.pdf
- OPN的異常表達與膠質瘤的相關性研究.pdf
- FOXD1在膠質瘤中的表達及其與膠質瘤病人預后的關系.pdf
評論
0/150
提交評論