Dkk1在腫瘤診斷中的潛在應(yīng)用及其在腫瘤微環(huán)境中的作用.pdf

1、為獲得與肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的基因，本室通過(guò)cDNA芯片技術(shù)比較了肝細(xì)胞癌組織及相對(duì)應(yīng)的癌旁組織基因表達(dá)差異。從有較大表達(dá)差異的基因中選取了一個(gè)在肝癌組織中高表達(dá)的基因Dkkl進(jìn)行研究。進(jìn)一步通過(guò)Northernblot方法，分析了Dkkl在12例肝癌組織和相對(duì)應(yīng)的癌旁組織的表達(dá)情況，結(jié)果顯示Dkkl在7例肝癌組織中有表達(dá)，而對(duì)應(yīng)的癌旁組織未檢測(cè)到Dkkl的表達(dá)。 Dkkl是一個(gè)分泌性糖蛋白，它對(duì)胚胎時(shí)期神經(jīng)的發(fā)育起重要作用，肝

2、癌發(fā)生后再次表達(dá)出來(lái)。首先，我們采用RT-PCR、熒光定量PCR、Westernblot和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)在多種人惡性腫瘤細(xì)胞系中對(duì)Dkkl的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)分析。RT一PCR、熒光定量PCR、Westernblot均能在10種不同腫瘤類型的人惡性腫瘤細(xì)胞系檢測(cè)到Dkkl的存在。進(jìn)一步用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到Dkkl蛋白在19種人惡性腫瘤細(xì)胞系的培養(yǎng)上清中有表達(dá)，蛋白表達(dá)量波動(dòng)于5ng/ml～210ng/ml之間。 目前，診斷

3、和篩選肝細(xì)胞癌的主要方法是通過(guò)超聲影像和血清AFP檢測(cè)。那么Dkkl是否可以作為一個(gè)肝癌的腫瘤標(biāo)志物呢?我們應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了18例正常人、14例肝硬化病人、128例肝癌病人血清中Dkkl的濃度。結(jié)果顯示Dkkl在部分肝細(xì)胞癌病人血清中有較高表達(dá)，但各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)差異可能與樣本量少，變異性大有關(guān)。 Dkkl作為Wnt通路的一個(gè)抑制性蛋白在肝癌組織中高表達(dá)，提示該蛋白在肝癌發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮著重要作用。通過(guò)在