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1、目的:建立胚胎大鼠海馬神經(jīng)元和皮層神經(jīng)元體外培養(yǎng)技術(shù),了解色素上皮源性因子(PEDF)對(duì)海馬神經(jīng)元的營(yíng)養(yǎng)支持和促突起生長(zhǎng)作用,以及對(duì)皮層神經(jīng)元過(guò)氧化氫損傷的保護(hù)作用。 方法:1)建立胚胎大鼠海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)技術(shù)。采用免疫熒光染色顯示神經(jīng)元的形態(tài),Neurolucida測(cè)量神經(jīng)元突起長(zhǎng)度,由此觀察PEDF對(duì)海馬神經(jīng)元存活和突起生長(zhǎng)的影響。2)建立胚胎大鼠皮層神經(jīng)元體外培養(yǎng)技術(shù),采用過(guò)氧化氫構(gòu)建皮層神經(jīng)元體外損傷模型,測(cè)量LDH釋
2、放值,以觀察PEDF對(duì)皮層神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用。 結(jié)果:1)PEDF可提高海馬神經(jīng)元的存活率,并對(duì)存活細(xì)胞的活力和突起生長(zhǎng)有明顯促進(jìn)作用。2)PEDF可以促進(jìn)海馬神經(jīng)元的突起生長(zhǎng),并具有一定的劑量依賴性。低濃度(25ng/ml)PEDF相對(duì)有利于軸突生長(zhǎng),而高濃度(100ng/ml)PEDF相對(duì)有利于樹突生長(zhǎng)。3)PEDF可以保護(hù)皮層神經(jīng)元免受低濃度(500μM)過(guò)氧化氫損傷,并具有劑量依賴效應(yīng)。但對(duì)高濃度過(guò)氧化氫(2000μM
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