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文檔簡介
1、本研究的目的是探討前庭傳入性神經(jīng)元與前庭傳出性神經(jīng)元之間直接的中樞神經(jīng)通路,并直觀地顯示出本通路的神經(jīng)元胞體及其纖維走形。 方法:在實驗第一部分中,運用順行、逆行雙重熒光神經(jīng)示蹤技術,于大鼠前庭內側核或外側核注射綠色順行熒光示蹤劑PHA-L(含熒光素),在對側外周前庭注射紅色逆行熒光示蹤劑5%MFS(含熒光微球),行腦干連續(xù)冰凍切片,在熒光顯微鏡及激光共聚焦顯微鏡下觀察熒光細胞的分布及形態(tài)。在實驗第二部分中,運用膜片鉗電生理技術
2、,于前庭內側核放置刺激電極,同側面神經(jīng)膝內側的前庭傳出神經(jīng)元胞體內置入記錄電極,行膜片鉗的全細胞記錄。刺激前庭內側核的傳入神經(jīng)元,記錄傳出神經(jīng)元的突觸后電流。在實驗第三部分中,于面神經(jīng)膝內側的前庭傳出神經(jīng)元細胞群區(qū)放置刺激電極,同側前庭內側核前庭傳入神經(jīng)元胞體內置入記錄電極,給予刺激后記錄動作電位;然后運用細胞內示蹤技術,導入細胞內示蹤劑biocytin,連續(xù)冰凍切片后ABC染色、DAB呈色;顯微鏡下觀察染色細胞及其纖維走行,并進行通路
3、重建與顯示。 結果:第一部分的實驗發(fā)現(xiàn)紅色熒光示蹤劑可以標記出前庭傳出神經(jīng)元的胞體及樹突:前庭傳出神經(jīng)元主要分布于雙側面神經(jīng)膝的內側,背外側(即groupE)及網(wǎng)狀結構的橋腦尾狀核區(qū),還有小部分位于面神經(jīng)膝的腹側,注射對側腦干的細胞數(shù)目多于同側;分布于面神經(jīng)膝內側的神經(jīng)元多為梭形,分布于面神經(jīng)外側的神經(jīng)元為類圓形或梭形,分布于網(wǎng)狀系統(tǒng)的神經(jīng)元多為三角形,胞體較大。綠色熒光標記的神經(jīng)纖維為前庭內側核或外側核神經(jīng)元發(fā)出的纖維,主要分
4、布于面神經(jīng)膝的內外側及網(wǎng)狀結構系統(tǒng)。在面神經(jīng)膝內側、外側及網(wǎng)狀結構的橋腦尾狀核區(qū)都能發(fā)現(xiàn)被紅色、綠色雙重熒光標記而呈現(xiàn)黃色的雙標細胞。第二部分的實驗中發(fā)現(xiàn)面神經(jīng)膝內側的前庭傳出神經(jīng)元的靜息電位約一55mv一70mv。刺激前庭內側核的傳入神經(jīng)元,可在傳出神經(jīng)元胞體內記錄到突觸后電流,以興奮性突觸后電流為主。第三部分的實驗中發(fā)現(xiàn),刺激面神經(jīng)膝內側的前庭傳出神經(jīng)元細胞群,在同側前庭內側核傳入神經(jīng)元的胞體內可記錄到動作電位,為鋒電位,振幅62.
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