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文檔簡介
1、目的:活化的胰星狀細(xì)胞是胰腺癌組織中的重要間質(zhì)細(xì)胞,胰星狀細(xì)胞在胰腺癌中的作用目前還不完全清楚。本研究建立上清-細(xì)胞共培養(yǎng)模型,研究永生化人胰星狀細(xì)胞(immortalized pancreatic stellate cells,IPSC)對胰腺癌細(xì)胞株P(guān)atu8988增殖、凋亡、遷移、侵襲、粘附能力的影響,并初步研究其可能的分子機(jī)制。
方法:制備IPSC上清,建立IPSC上清和Patu8988共培養(yǎng)的模型,并以單獨培養(yǎng)的
2、Patu8988為對照,檢測共培養(yǎng)后Patu8988細(xì)胞增殖、凋亡、粘附、遷移和侵襲能力的變化;通過檢測Patu8988細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)相關(guān)基因Snail、E-鈣粘蛋白(E-cadherin)、波狀蛋白(Vimentin)的mRNA以及蛋白水平表達(dá)的變化,觀察IPSC對Patu8988上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的影響。
結(jié)果:在與IPSC上清共培養(yǎng)
3、后,Patu8988的增殖、粘附、遷移以及侵襲能力均有明顯增強(qiáng)(p<0.05),而H2O2誘導(dǎo)的Patu8988細(xì)胞凋亡受到抑制。RT-PCR及Western blot顯示,與IPSC上清共培養(yǎng)后,Patu8988表達(dá)上皮特性的基因E-cadherin下調(diào),而表達(dá)間質(zhì)特性的基因snail和Vimentin的表達(dá)上調(diào),兩者均具有時間依賴性。
結(jié)論:永生化胰星狀細(xì)胞能促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞株P(guān)atu8988的增殖、粘附、遷移和侵襲,并
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