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1、目的:鑒于神經(jīng)內(nèi)分泌活動在生物體的衰老調(diào)控中起重要作用,本研究從突觸和感覺及中間神經(jīng)元入手,篩選參與秀麗線蟲衰老調(diào)控的新基因并分析其功能特性,以深入對衰老調(diào)控機(jī)制的了解。 方法: 1)以野生型和長、短壽突變體為對照,從突觸、感覺及中間神經(jīng)元功能相關(guān)基因突變體中用壽命分析方法篩選壽命異于野生型的突變體,并進(jìn)一步檢測了腸道中的脂褐質(zhì)。2)測試候選突變體永久性幼蟲的形成情況。3)測試篩選得到突變體的進(jìn)食、運動、生殖、脂肪積累及15℃、
2、25℃的壽命曲線。3)用半定量RT-PCR法考察線蟲衰老調(diào)控中起重要作用的daf-2和 daf-16的突變對部分基因表達(dá)情況的影響。 結(jié)果:除去有文獻(xiàn)報道的,共篩選得到14個突觸功能相關(guān)基因(sbt-1、 cab-1可促進(jìn)衰老;unc-10、Syd-2、hlb-1、dik-1、mkk-4、Scd-2、rab-3、Snb-1、ric-4、nrx-1、nlg-1、wwp-1可抑制衰老)和7個感覺及中間神經(jīng)元功能相關(guān)基因(glr-1、
3、tax-6、osm-10、ceh-10、unc-86、lin-32、odr-4可抑制衰老)參與線蟲衰老的調(diào)控。其中突觸基因syd-2、snb-1、rab-3、hlb-1、mkk-4、ric-4,感覺及中間神經(jīng)元基因tax-6、ceh-10、unc-86也參與永久性幼蟲的調(diào)控。許多篩選出的突變體在進(jìn)食、運動或生殖等方面也表現(xiàn)出缺陷,說明一些基因的突變可能以間接的方式影響線蟲的衰老。daf-2和daf-16參與調(diào)節(jié)部分影響線蟲衰老或永久性幼
4、蟲形成的基因的表達(dá),提示這些基因和insulin/IGF-1信號通路間存在遺傳關(guān)系。 結(jié)論:1)突觸的功能活動可能參與線蟲衰老的調(diào)節(jié),部分相關(guān)基因可能是通過與insulin/TGF-1信號通路相互作用來發(fā)揮衰老調(diào)節(jié)的功能;一些基因突變則會通過改變線蟲其它生理活動間接地影響衰老。2)線蟲可能通過多種類型的感覺及中間神經(jīng)元感知、傳遞及整合外界環(huán)境信息,產(chǎn)生正反兩種信號對衰老進(jìn)行調(diào)控,這種調(diào)控不完全依賴于 ILS通路;部分基因突變也會
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