東方蜜蜂微孢子蟲孢子的冷凍保存及活性研究.pdf

1、東方蜜蜂微孢子蟲(Nosema ceranae)是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生真菌，最早在中華蜜蜂體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)時認(rèn)為中華蜜蜂是其唯一寄主，后又在西方蜜蜂上發(fā)現(xiàn)。雖然西方蜜蜂微孢子蟲(N.apis)侵染蜜蜂的發(fā)現(xiàn)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)的早于東方蜜蜂微孢子蟲，但近年來越來越多的研究表明，東方蜜蜂微孢子蟲的分布地域廣泛，對蜜蜂的致病性要強于西方蜜蜂微孢子蟲，而且有逐漸取代西方蜜蜂微孢子蟲，成為侵染蜜蜂的主要微孢子蟲種類的趨勢。因此，對東方蜜蜂微孢子蟲的研究非常必要。<

2、br>　　然而，由于東方蜜蜂微孢子蟲侵染西方蜜蜂具有季節(jié)性，在某些階段常難以收集到孢子，導(dǎo)致實驗開展困難，因此東方蜜蜂微孢子蟲的室內(nèi)保存成為開展持續(xù)研究必須解決的一個問題。本文第二章研究了用幾種不同保護劑低溫保存東方蜜蜂微孢子蟲的效果，詳細(xì)介紹了通過DAPI熒光染料來區(qū)分有活性的和無活性的孢子，并進一步用冷凍后的孢子對工蜂的侵染性進行了侵染活力檢測。研究發(fā)現(xiàn)，-80℃條件下，10％甘油保存的東方蜜蜂微孢子蟲，孢子平均死亡率為(31.8±

3、7.3)%，比其他幾種冷凍保護劑的效果都好。
　　通過對冷凍孢子與新鮮孢子侵染蜜蜂的對比，研究發(fā)現(xiàn)，即使是冷凍后的孢子，侵染工蜂2周后孢子數(shù)量仍然能達(dá)到一個很高的水平，-80℃條件下不同冷凍保護劑保存的孢子侵染蜜蜂相同時間后，孢子數(shù)量在統(tǒng)計學(xué)上并無顯著差異(p=0.215)。
　　蜜蜂微孢子蟲病是成年蜜蜂常見的慢性傳染病，現(xiàn)在主要由東方蜜蜂微孢子蟲引起，雖然患病蜜蜂未表現(xiàn)出明顯的疾病特征，但孢子侵染后導(dǎo)致蜜蜂體質(zhì)下降，壽命縮

4、短，嚴(yán)重影響到蜂群的繁殖和養(yǎng)蜂業(yè)的發(fā)展。因此，防治蜜蜂微孢子蟲病對蜂群的健康生產(chǎn)很重要，使用消毒劑殺滅孢子以阻斷傳播途徑就是一種預(yù)防病害流行的重要手段。在論文第三章中，就幾種常用化學(xué)消毒劑對東方蜜蜂微孢子蟲的滅活效果進行了比較研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通常用于防治蜂螨的甲酸，對東方蜜蜂微孢子蟲的活性具有顯著的影響，35%甲酸作用30min后孢子死亡率為(99.4±0.8)%。新潔爾滅殺滅東方蜜蜂微孢子蟲孢子的效果也同樣顯著，最高孢子死亡率為(99