版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、本文探究分析了蝗蟲微孢子蟲的免疫逃避及侵染宿主東亞飛蝗的分子機制,并以蝗蟲微孢子蟲的胞壁蛋白作為靶標(biāo)初步明確了其侵染宿主之途徑。
1.實驗中運用固相雙向電泳(Immobilized pH Gradient two-dimensionalelectrophoresis,2-DE)和MALDI-TOF-MS等技術(shù),發(fā)現(xiàn)一個分子量為23 kDa蝗蟲微孢子蟲胞壁蛋白,其信號肽含有19個氨基酸。將其命名為AlocSWP2,AlocSWP
2、2主要結(jié)構(gòu)特點:含有一個N糖基化位點、一個肝素結(jié)合位點和4個保守的半胱氨酸位點。
2.實驗中將利用成功獲取的目的基因AlocSWP2,進行體外原核表達,成功構(gòu)建原核表達菌BL21(DE3,pGEX4T-1-AlocSPW2)。超聲破碎BL21(DE3)表達菌后,經(jīng)SDS-PAGE檢測,上清和沉淀中均含有目標(biāo)蛋白,但沉淀中AlocSWP2蛋白含量比上清多,上清中AlocSPW2蛋白含有活性,沉淀中此蛋白形成包涵體。然后將蛋白純化
3、,得到較純的AlocSWP2蛋白。并成功制備多克隆抗血清,利用WesternBlotting法檢測特異性較好。免疫膠體金實驗結(jié)果證實:AlocSWP2蛋白清楚顯現(xiàn)位于蝗蟲微孢子蟲的孢壁上。
3.為探究AlocSWP2蛋白的功能主要進行了RNAi干擾、侵染實驗以及GST/His-pull down實驗。RNAi干擾實驗結(jié)果表明:未干擾比干擾的東亞飛蝗AlocSWP2轉(zhuǎn)錄表達量高約6倍,顯示干擾作用顯著。侵染實驗中,宿主東亞飛蝗出
4、現(xiàn)一些病癥:與健蟲相比較,感染蝗蟲微孢子蟲后的病蟲蛻皮困難,有些病蟲因未能蛻皮導(dǎo)致死亡。行動遲緩,體色逐漸變成深褐色,進而整個蟲體發(fā)紅,直至死亡。而在解剖實驗中,觀察到病蟲的中腸出現(xiàn)大面積潰爛,脂肪體消耗殆盡。同時侵染實驗呈現(xiàn)結(jié)果也印證了存在干擾的可能性,即AlocSWP2在侵染宿主過程中與免疫相關(guān),因而RNAi干擾后蝗蟲死亡明顯延遲。
4.實驗中利用GST/His-pull down實驗探究東亞飛蝗中腸、脂肪體以及其他組織是
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 蝗蟲微孢子蟲噴霧助劑選配及其沉積特性研究.pdf
- 蝗蟲微孢子蟲孢壁蛋白的鑒定及功能分析.pdf
- 蝗蟲微孢子蟲水基懸浮劑及其生物活性的試驗研究.pdf
- 蝗蟲微孢子蟲病對東亞飛蝗聚集行為及其聚集信息素釋放的影響.pdf
- 家蠶微孢子蟲侵染相關(guān)表面蛋白SP84的分離、純化及鑒定.pdf
- 不同宿主貝氏隱孢子蟲分離株宿主適應(yīng)性研究.pdf
- 家蠶微孢子蟲孢壁蛋白SWP26及其宿主互作蛋白的研究.pdf
- 鹿源隱孢子蟲和畢氏腸微孢子蟲分子遺傳特征鑒定及其多態(tài)性分析.pdf
- 51788.腺病毒侵染與trail誘導(dǎo)宿主細胞凋亡的分子機制研究
- 粉紋夜蛾微孢子蟲的初步研究.pdf
- 東方蜜蜂微孢子蟲孢子的冷凍保存及活性研究.pdf
- 柞蠶微孢子蟲核糖體基因及家蠶、柞蠶微孢子蟲蛋白質(zhì)組以及侵染家蠶后中腸的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 我國蜜蜂微孢子蟲種質(zhì)分布及侵染意蜂中腸的蛋白質(zhì)組分析.pdf
- 中國非人靈長類隱孢子蟲、賈第蟲及微孢子蟲的分子流行病學(xué)研究和多位點基因分型.pdf
- 家蠶微孢子蟲檢測技術(shù)研究及藍葉蟲微孢子蟲RPB1基因克隆與分析.pdf
- 微孢子蟲感染家蠶相關(guān)基因的研究.pdf
- 宿主細胞自噬對微小隱孢子蟲入侵影響的初步研究.pdf
- 羊微孢子蟲病流行病學(xué)調(diào)查及分子特征初步研究.pdf
- 家蠶微孢子蟲檢測及微粒子病預(yù)報研究——家蠶微孢子蟲單克隆抗體的制備及其應(yīng)用初探.pdf
- 宿主分子TXNIP影響HCV復(fù)制的分子機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論