貴州民族藥石楠藤的抗凝血作用及藥材質(zhì)量控制研究.pdf

1、目的:觀察貴州兩個(gè)產(chǎn)地的石楠藤藥材提取物的抗凝血作用;建立石楠藤藥材的顯微鑒別、薄層鑒別、水分和灰分雜質(zhì)檢查及活性成分含量測(cè)定項(xiàng);初步建立石楠藤藥材的HPLC特征圖譜。從藥材外觀性狀到內(nèi)在質(zhì)量綜合分析該藥材的品質(zhì)，充實(shí)貴州民族藥的基礎(chǔ)研究，為該藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升及其相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法:1、采用測(cè)定小鼠斷尾出血時(shí)間(BT)、毛細(xì)管法測(cè)定凝血時(shí)間(CT)及復(fù)鈣法測(cè)定血漿凝固時(shí)間（RT）。2、照《中國藥典》2

2、010版一部附錄ⅥB薄層色譜法，對(duì)石楠藤藥材中的活性成分海風(fēng)藤酮進(jìn)行薄層鑒別;照《中國藥典》2010版一部附錄ⅨH水分測(cè)定法（第一法），測(cè)定石楠藤藥材水分含量;照《中國藥典》2010版一部附錄ⅨK灰分測(cè)定法，測(cè)定石楠藤藥材的總灰分含量;照《中國藥典》2010版一部附錄XA中的醇溶性浸出物測(cè)定法，測(cè)定藥材的乙醇浸出物含量;照《中國藥典》2010版一部附錄ⅥD高效液相色譜法，通過提取條件和色譜條件的優(yōu)化，建立海風(fēng)藤酮的含量測(cè)定方法，進(jìn)行不同

3、產(chǎn)地、不同采收期石楠藤藥材中海風(fēng)藤酮的含量測(cè)定分析;采用高效液相色譜法，通過提取條件和色譜條件的優(yōu)化，構(gòu)建石楠藤藥材的HPLC特征圖譜;照《中國藥典》2010版一部附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法（甲法）提取揮發(fā)油，采用GC-MS法測(cè)定兩個(gè)產(chǎn)地同一時(shí)間采集石楠藤藥材的揮發(fā)油成分。3、通過藥材顯微結(jié)構(gòu)結(jié)合HPLC特征圖譜分析比較石楠藤藥材及市場(chǎng)上常見混淆品之間的差異。
　　 結(jié)果:1、70％乙醇、石油醚提取物等均具有明顯延長小鼠BT的作用，7

4、0％乙醇提取后藥渣的水提物、正丁醇萃取后剩余部分無明顯延長小鼠BT的作用;70％乙醇、石油醚及水提取物均具有明顯延長小鼠CT的作用;而所有提取物對(duì)小鼠RT均無明顯影響。2、海風(fēng)藤酮的薄層鑒別，以硅膠GF254為固定相，石油醚-丙酮(2∶1)為展開劑展開效果較好，供試品色譜中，在與對(duì)照品海風(fēng)藤酮色譜相應(yīng)的位置上，置紫外光燈（254nm）下顯相同顏色的斑點(diǎn)。不同產(chǎn)地石楠藤藥材中海風(fēng)藤酮的含量有明顯差異，以貴州金沙產(chǎn)藥材的含量最高，貴州赤水產(chǎn)

5、藥材的含量最低;藥材水分含量為4.9％～10.6％，總灰分含量7.2％～14.8％，乙醇浸出物含量為12.6％～21.2％;不同采收期藥材中海風(fēng)藤酮的含量，從花前期至花期迅速增加，在7月份時(shí)達(dá)到最高值，果期之后明顯下降;測(cè)定的12批石楠藤樣品中有12個(gè)特征峰，其相對(duì)保留時(shí)間的RSD為0.079％～1.1％，峰面積比值的RSD為149.30％～327.44％。3、從藥材顯微構(gòu)造和HPLC特征圖譜分析比較結(jié)果顯示，石楠藤藥材及市場(chǎng)上常見混淆

6、品之間存在較明顯的差異。
　　 結(jié)論:1、石楠藤藥材的提取物具有抗凝血作用，作用特點(diǎn)不同;正丁醇萃取后剩余部分有促凝血作用。2、建立了藥材中海風(fēng)藤酮的薄層鑒別法和含量測(cè)定方法，方法簡便可行、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確，為該藥材的質(zhì)量控制提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù);石楠藤藥材中海風(fēng)藤酮含量動(dòng)態(tài)研究結(jié)果支持《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（2003年版）中石楠藤藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的采收期，該藥材生產(chǎn)在確定采收期時(shí)應(yīng)結(jié)合質(zhì)量和產(chǎn)量加以考慮，以夏季至秋季采