黃芩藥材的質(zhì)量控制研究.pdf

1、中藥材是一個(gè)復(fù)雜混合體系,其質(zhì)量好壞直接影響中藥材、中藥飲片和中成藥的臨床療效。采收期和采收年限是影響中藥材質(zhì)量的第一關(guān),怎樣確定中藥材的適宜采收期和采收年限一直是中藥領(lǐng)域的研究重點(diǎn)和熱點(diǎn)。黃芩是我國(guó)中醫(yī)臨床常用大宗藥材品種之一,其化學(xué)成分非常復(fù)雜,如果只研究其個(gè)別成分,并以此作為評(píng)價(jià)黃芩質(zhì)量的依據(jù),就不能反映出藥材內(nèi)所有組分的整體協(xié)同作用。本文以黃芩作為研究對(duì)象,采用紅外光譜三級(jí)鑒別法(傅里葉變換紅外光譜、二階導(dǎo)數(shù)紅外光譜和二維相關(guān)紅

2、外光譜)對(duì)不同采收期和不同年限黃芩的整體信息進(jìn)行了分析和鑒定,并通過(guò)主成分分析法對(duì)大量的黃芩樣品進(jìn)行采收季節(jié)區(qū)分,從而鑒別出不同采收期和不同年限的黃芩。
　　藥材保質(zhì)期的研究也是中藥質(zhì)量控制的環(huán)節(jié)之一。目前,沒(méi)有相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)對(duì)黃芩的貯存時(shí)間進(jìn)行規(guī)定,導(dǎo)致已保存多年的黃芩仍然在市場(chǎng)上流通使用,這些藥材可能產(chǎn)生霉變,蟲蛀,變色等變質(zhì)現(xiàn)象,使藥材品質(zhì)降低,影響其安全性和有效性。只有科學(xué)有效的控制藥材保質(zhì)期,才能得到效果好、質(zhì)量高的中藥

3、材。本實(shí)驗(yàn)采用加速試驗(yàn)法對(duì)不同貯藏期黃芩的成分變化進(jìn)行研究,為以后進(jìn)一步研究黃芩貯藏期提供試驗(yàn)依據(jù)。本文還對(duì)室溫條件下貯藏的黃芩進(jìn)行研究,以期為黃芩的保質(zhì)期提供指導(dǎo)。
　　目的:
　　1、用紅外光譜三級(jí)鑒別法和主成分分析法分析不同采收期黃芩的成分變化,快速鑒別出不同采收期的黃芩,為黃芩的采收及相關(guān)產(chǎn)業(yè)提供科學(xué)依據(jù)。
　　2、采用紅外光譜三級(jí)鑒別法分析不同年限黃芩成分的動(dòng)態(tài)變化,以鑒別黃芩的采收年限,為以后臨床用藥打下基

4、礎(chǔ)。
　　3、通過(guò)加速試驗(yàn)法研究黃芩的貯藏穩(wěn)定性,以紅外光譜法三級(jí)鑒別法和高效液相色譜法(HPLC-DAD)分析黃芩藥材的整體變化和局部變化,初步研究貯藏時(shí)間對(duì)黃芩質(zhì)量的影響。
　　4、在加速試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用紅外光譜法(FTIR)法和高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-DAD-MS)進(jìn)一步研究室溫條件下黃芩的貯藏穩(wěn)定性,從而為黃芩藥材保質(zhì)期的建立提供參考依據(jù)。
　　方法:
　　1、選用溴化鉀壓片法制樣,得到一維紅外

5、光譜圖,再將樣品藥片裝入程序控制變溫附件,從50~120℃,每隔10℃測(cè)試樣品的紅外光譜,得到在熱微擾下樣品的二維相關(guān)紅外光譜。
　　2、采用Agilent XDB-C18柱(2.1mm×150mm,3.5μm);1％冰醋酸水溶液﹑乙腈為流動(dòng)相,進(jìn)行線性梯度洗脫;檢測(cè)波長(zhǎng)276nm;流速0.2mL·min-1;柱溫25℃;進(jìn)樣量2μL。
　　3、采用HPLC-DAD-MS/MS電噴霧負(fù)離子模式進(jìn)行掃描,得到質(zhì)譜數(shù)據(jù),選用Ag

6、ilent XDB-C18柱(2.1mm×150mm,3.5μm);0.1%甲酸水溶液、乙腈為流動(dòng)相,進(jìn)行線性梯度洗脫;檢測(cè)波長(zhǎng)276nm;流速0.2mL·min-1;柱溫25℃;進(jìn)樣量2μL。
　　結(jié)果:
　　1、春季和秋季采收藥材紅外光譜的峰位置有一定差別,春季酯類峰和黃酮類峰的相對(duì)峰強(qiáng)度分別在0.38和0.94以上,秋季分別在0.3和0.9以下。二者的差異在二階導(dǎo)數(shù)譜及二維相關(guān)紅外光譜上更加直觀顯著。另外,黃芩紅外光譜

7、主成分分析可快速準(zhǔn)確地判別大量黃芩樣本的采收季節(jié)。
　　2、研究發(fā)現(xiàn)一年生和三年生的10個(gè)樣本譜圖有較大差異,二年生10個(gè)樣本譜圖比較相似;二年生的酯類C=O特征吸收峰1740cm-1強(qiáng)于一年生和三年生,三年生的黃酮類成分特征吸收峰1614 cm-1強(qiáng)于一年生和二年生。另外,不同年限1058cm-1糖苷吸收峰的峰形不同。二維相關(guān)紅外光譜中,不同年限黃芩的最強(qiáng)自動(dòng)峰位置也不同。
　　3、加速試驗(yàn)條件下,通過(guò)紅外光譜三級(jí)鑒別分析

8、法可知不同貯藏期黃酮吸收峰(1658,1614cm-1)和糖類吸收峰(1069cm-1)的峰強(qiáng)、峰形、峰位置變化十分明顯;貯藏0、1、2和3個(gè)月黃芩的相關(guān)系數(shù)分別為1,0.9670,0.8570和0.7308。HPLC測(cè)得隨著貯藏時(shí)間的推移,黃芩苷和漢黃芩苷含量下降,黃芩素和漢黃芩素的含量是先增加后減少。
　　4、不同貯藏期黃芩紅外光譜的譜峰的位置、性狀和強(qiáng)度基本一致,6個(gè)化學(xué)成分被確定,不同貯藏期成分含量基本穩(wěn)定,無(wú)明顯變化。<

9、br>　　結(jié)論:
　　1、春季采收的黃芩黃酮類、酯類成分高于秋季,春季和秋季采收的黃芩所含糖類物質(zhì)也不同。黃芩紅外光譜主成分分析可快速準(zhǔn)確地判別大量黃芩樣本的采收季節(jié)。紅外光譜三級(jí)鑒別法與主成分分析相結(jié)合,可以為不同采收期中藥的鑒別和研究提供簡(jiǎn)便有效的分析方法。
　　2、一年生和三年生黃芩不穩(wěn)定,二年生較穩(wěn)定。二年生黃芩酯類物質(zhì)含量最高,三年生黃芩黃酮類最高。因此,不同年限黃芩藥材所含成分及含量不盡相同,用藥應(yīng)根據(jù)藥材年限調(diào)