腎透明細(xì)胞癌中Survivin表達(dá)及其與bcl-2和p53的相關(guān)性研究.pdf

1、腎透明細(xì)胞癌(renal clear cell carcinoma，RCCC)是人類腎細(xì)胞癌(re-nal cell carcinoma，RCC)中最常見的病理類型，確切病因尚不明了，分子生物學(xué)研究揭示，癌基因和/或抑癌基因的突變、過度表達(dá)、細(xì)胞增殖活性異常以及細(xì)胞凋亡過程的抑制，在RCC發(fā)病機(jī)制中均起重要作用。凋亡調(diào)節(jié)紊亂有助于細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化和腫瘤的進(jìn)展，是惡性腫瘤形成的重要機(jī)制之一。凋亡抑制蛋白(inhibitor of apopt

2、osis protein，IAP)是抑制細(xì)胞凋亡的重要成分。Survivin蛋白是IAP家族的新成員，其組織分布具有明顯的細(xì)胞選擇性：在正常成人已分化的成熟組織(胸腺、生殖腺除外)不表達(dá)，而在人類多種腫瘤中有表達(dá)。bcl-2基因，p53基因是研究較為深入的與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的凋亡相關(guān)基因。凋亡抑制因子在腫瘤進(jìn)展中的作用日益受到人們的關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)了53例RCCC組織中Sur-vivin蛋白、bcl-2蛋白、p53

3、蛋白的表達(dá)，并且探討了它們之間的相互關(guān)系，旨在揭示它們?cè)赗CCC發(fā)生、發(fā)展、臨床診斷及預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值。 材料與方法 選手術(shù)切除的RCCC標(biāo)本53例，男38例，女15例，年齡48-75歲，平均62.1歲。根據(jù)Fuhrman腎細(xì)胞癌形態(tài)分級(jí)系統(tǒng)分為Gi級(jí)7例，G<,2>級(jí)18例，G<,3>級(jí)16例，G<,4>4級(jí)12例。按Robson標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行臨床分期：I期15例，Ⅱ期17例，Ⅲ期16例，Ⅳ期5例。正常對(duì)照12例，取自

4、癌旁正常腎組織。 標(biāo)本均采用10[％]中性福爾馬林固定，石蠟包埋，制成4μm厚切片備用。按免疫組化S-P法常規(guī)操作技術(shù)進(jìn)行染色，一抗為鼠抗人Survivin，bcl-2，p53單克隆抗體，DAB顯色，蘇木素復(fù)染。陽性對(duì)照用已知陽性片，陰性對(duì)照用PBS替代一抗。顯微鏡下細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色染色為陽性細(xì)胞。隨機(jī)選擇5個(gè)高倍視野(×400)，每個(gè)視野觀察100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞百分率，取5個(gè)視野陽性細(xì)胞平均百分率為顯色指數(shù)

5、，顯色指數(shù)小于等于10％為陰性，大于lO％為陽性。 用SPSSl2.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組間陽性率比較采用χ<'2>檢驗(yàn)(P<0.05)。 結(jié)論： 1．Survivin蛋白在RCCC腫瘤細(xì)胞中表達(dá)升高，提示SurviVin基因可能通過抑制RCCC腫瘤細(xì)胞凋亡，對(duì)RCCC的發(fā)生發(fā)展起重要作用；SurviVin蛋白表達(dá)與RCCC病理分級(jí)、臨床分期密切相關(guān)，可作為判斷病情和評(píng)價(jià)預(yù)后的指標(biāo)。 2．Bc