CXCL1作為胃癌進(jìn)展分子標(biāo)記的研究.pdf

1、胃癌是最常見的消化道惡性腫瘤之一。在我國，其發(fā)病率和死亡率居各種惡性腫瘤前三位。胃癌的根治性手術(shù)是胃原發(fā)性腫瘤的唯一可能治愈的方法，大多數(shù)治療失敗的根本原因在于缺乏對胃癌病期的正確評估和早期診斷。目前，約有50％的患者得不到根治，總體5年生存率僅在20％-30％左右，因此早期判斷患者腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，對疾病的治療和預(yù)后有著重要的指導(dǎo)作用。由于胃癌本身的異質(zhì)性，尚缺乏敏感性高、特異性強(qiáng)的早期診斷指標(biāo)。通過尋找新的腫瘤標(biāo)記物預(yù)測胃癌的進(jìn)展，

2、以期實(shí)現(xiàn)患者的個(gè)體化治療已成為研究熱點(diǎn)和臨床亟待解決的問題。
　　 CXCL1即趨化因子生長調(diào)節(jié)基因1，屬于趨化因子CXC家族。CXCL1在巨噬細(xì)胞，中性粒細(xì)胞和上皮細(xì)胞中表達(dá)，并呈現(xiàn)中性粒細(xì)胞趨化活性。CXCR2是CXCL1的趨化因子受體，與CXCL1結(jié)合后表現(xiàn)出趨化作用。先前的研究表明，CXCL1可能參與多種腫瘤細(xì)胞的發(fā)生和轉(zhuǎn)移等一系列事件，但CXCL1與胃癌發(fā)生發(fā)展的研究尚為空白。探索CXCL1在不同分期的胃癌中的表達(dá)，將

3、有助于我們進(jìn)一步了解胃癌的發(fā)生、發(fā)展過程，并有望提高臨床分期評估的準(zhǔn)確度。
　　 我們的實(shí)驗(yàn)采用GenomicTree(Daejeon,Korea)芯片技術(shù)，檢測了96例胃癌組織和98例正常胃組織中差異基因的表達(dá)譜。在這些差異基因中，腫瘤組織編碼分泌蛋白并且與正常人相比2倍過表達(dá)的基因被選中做進(jìn)一步分析。通過IngenuityPathway Analysis(IPA)分析，我們發(fā)現(xiàn)了與胃癌腫瘤顯著相關(guān)的34個(gè)基因。我們的研究發(fā)現(xiàn)

4、，與多種腫瘤進(jìn)展相關(guān)的趨化因子CXCL1與胃癌的發(fā)生發(fā)展和浸潤轉(zhuǎn)移等事件密切相關(guān)。應(yīng)用96例胃癌病人和48例正常人的血清做進(jìn)一步的ELISA檢測驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，胃癌患者血清樣本中CXCL1的表達(dá)較正常人明顯升高，兩者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。在胃癌患者中，隨著腫瘤的分期增加和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的增多，CXCL1在血清中的表達(dá)明顯增高。這些數(shù)據(jù)為CXCL1可以作為胃癌進(jìn)展的分子標(biāo)記提供了可靠的證據(jù)。
　　 本論文的內(nèi)容分以下兩個(gè)部分：

5、r>　　 第一部分:應(yīng)用寡核苷酸基因表達(dá)譜芯片對胃癌基因水平的研究
　　 目的：檢測胃癌與正常胃組織中差異基因的表達(dá)，以及差異基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用
　　 方法：采用基因芯片技術(shù)方法
　　 結(jié)果：胃癌組織與正常胃組織存在明顯的差異基因，其中與腫瘤發(fā)生相關(guān)的基因有29個(gè)，與腫瘤惡性程度相關(guān)的有18個(gè)基因，與腫瘤細(xì)胞死亡相關(guān)的基因有15種，與腫瘤發(fā)展相關(guān)的基因有13種；另外，12種基因與腫瘤的侵襲相關(guān)，11

6、種基因與腫瘤的增殖有關(guān)，9種基因與腫瘤的生長有關(guān)，8種基因與腫瘤的遷移有關(guān)，7種基因與腫瘤細(xì)胞的分離有關(guān)，5種基因與腫瘤血管的生成有關(guān)，3種基因與腫瘤細(xì)胞周期有關(guān)，2個(gè)基因與腫瘤的轉(zhuǎn)化相關(guān)，2個(gè)基因與腫瘤細(xì)胞分化相關(guān)。其中CXCL與胃癌的發(fā)生、惡性程度、發(fā)展、侵襲、增殖、生長、遷移、血管新生、轉(zhuǎn)化相關(guān)。
　　 結(jié)論：基因芯片是一個(gè)高效、快速的篩選胃癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的方法；與正常胃組織細(xì)胞相比，胃癌組織細(xì)胞中存在多種差異

7、基因的表達(dá)；胃癌組織中多種與腫瘤相關(guān)的差異基因表達(dá)上調(diào)，這些基因通過相互作用，影響著胃癌的發(fā)生發(fā)展
　　 第二部分:胃癌血清中CXCL1的表達(dá)及其與分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的研究
　　 目的：檢測驗(yàn)證血清中CXCL1的表達(dá)，研究CXCL1與胃癌的分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系
　　 方法：血清ELISA
　　 結(jié)果：血清中CXCL1的表達(dá)胃癌組明顯高于正常人組；IB、ⅢA、ⅢB、Ⅳ期胃癌患者血清中CXCL1的表達(dá)高于

8、正常人血清中的表達(dá)，IB、IIIB、IV期胃癌患者血清中CXCL1的表達(dá)水平明顯高于IA期胃癌患者中的血清表達(dá)；僅有Ⅳ期胃癌患者血清中CXCL1的表達(dá)水平明顯高于Ⅱ期胃癌患者血清中的表達(dá)水平；進(jìn)展期胃癌血清中CXCL1的表達(dá)水平高于早期患者；所有胃癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目與血清中CXCL1的表達(dá)水平之間的比較，采用Pearson相關(guān)系數(shù)分析，兩者之間存在顯著的正相關(guān)性(r=0.29,p=0.004)。
　　 結(jié)論：血清中CXCL1

9、的表達(dá)水平與胃癌的進(jìn)展分期，以及胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量呈線性正相關(guān)；血清中CXCL1的表達(dá)水平將可以作為胃癌進(jìn)展水平的分子標(biāo)記。
　　 全文結(jié)論
　　 1、基因芯片是一個(gè)高效、快速的篩選胃癌發(fā)生、發(fā)展相關(guān)基因的方法；
　　 2、與正常胃組織相比，胃癌組織中存在多種差異基因的表達(dá)；
　　 3、胃癌組織中多種與腫瘤相關(guān)的差異基因表達(dá)上調(diào)，這些基因相互協(xié)調(diào)作用，可能影響胃癌的發(fā)生發(fā)展；
　　 4、血清中CX